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产蛋鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及其遗传变异和血清型分析
引用本文:赵长润,张文,董志华,陈基明,范文胜,唐宁,韦天超,磨美兰,韦平. 产蛋鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及其遗传变异和血清型分析[J]. 南方农业学报, 2020, 51(8): 1816-1822. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2020.08.004
作者姓名:赵长润  张文  董志华  陈基明  范文胜  唐宁  韦天超  磨美兰  韦平
作者单位:广西大学动物科学技术学院,南宁 530004
摘    要:[目的]明确产蛋鸡源传染性支气管炎病毒(IBV)分离株(GX-YL170808)的结构基因及抗原变异情况,为广西种鸡场的传染性支气管炎(IB)防控提供科学依据.[方法]通过鸡胚尿囊液血凝试验、鸡胚侏儒化试验及3'端非编码区(3'-UTR)测序对分离株进行鉴定;采用RT-PCR扩增S1、E、M和N基因,以MegAlign和MEGA 6.0分别进行核苷酸序列相似性及系统发育进化树分析,运用RDP4和SimPlot对S1、E、M和N基因进行重组分析,利用NetNGlyc 1.0和NetOGlyc 4.0进行糖基化位点预测分析,并通过中和试验进行血清型鉴定.[结果]分离株的鸡胚尿囊液血凝试验呈阴性,鸡胚盲传5代后出现侏儒胚典型病变,其3'-UTR序列与IBV的3'-UTR序列相似性为99.13%;综合病鸡临床症状及其病理变化可确定该病毒为IBV,命名为GX-YL170808.GX-YL170808分离株S1、E、M和N基因的开放阅读框(ORF)长度分别为1620、327、675和1230 bp,对应编码540、109、225和410个氨基酸残基,与参考株的核苷酸序列相似性分别为60.4%~96.5%、81.8%~97.2%、85.6%~93.5%和85.7%~92.0%;GX-YL170808分离株的S1、M和N基因属于LX4型,而E基因属于LDT3型;4个结构基因内部均无重组区域;除S1基因同时具有N-糖基化和O-糖基化位点外,E、M和N基因均只有N-糖基化位点;S1蛋白裂解位点为HRRRR,与参考株LX4的裂解位点相同.GX-YL170808分离株属于血清4型,不同于常用的疫苗株H120(血清3型)和4/91(血清5型),也不同于广西主要侵害雏鸡的IBV优势血清型.[结论]产蛋鸡源IBV分离株并非疫苗株,其基因型和血清型均已发生变异,且该毒株的血清型不同于广西地区侵害雏鸡的优势血清型,提示了广西地区IB防控的严峻性及新型多价疫苗研发的紧迫性.

关 键 词:产蛋鸡   传染性支气管炎病毒(IBV)   分离鉴定   结构基因   基因型   血清型

Isolation and identification of an infectious bronchitis virus from laying hens and analysis of its genetic variability and serotype
ZHAO Chang-run,ZHANG Wen,DONG Zhi-hua,CHEN Ji-ming,FAN Wen-sheng,TANG Ning,WEI Tian-chao,MO Mei-lan,WEI Ping. Isolation and identification of an infectious bronchitis virus from laying hens and analysis of its genetic variability and serotype[J]. Journal of Southern Agriculture, 2020, 51(8): 1816-1822. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2020.08.004
Authors:ZHAO Chang-run  ZHANG Wen  DONG Zhi-hua  CHEN Ji-ming  FAN Wen-sheng  TANG Ning  WEI Tian-chao  MO Mei-lan  WEI Ping
Abstract:
Keywords:
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