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| 番木瓜幼叶原生质体分离研究 | |
| 作者姓名： | 唐文忠 陆国昆 廖 芬 黄茂康 黄伟雄 黄僚才 |
| 作者单位： | （1 广西农业科学院园艺研究所 南宁 530007 2 广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室 南宁 530007 3 南宁市西乡塘区心圩街道办事处 南宁 530003 4 广西农业科学院农产品加工研究所 南宁 530007 5 南宁市老口子农林业科技有限公司 南宁 530003） |
| 基金项目： | 广西自然科学基金项目（桂科自0728069）；南宁市科技成果转化与产业化示范项目（200902071B） |
| 摘 要： | 【目的】探讨番木瓜幼叶原生质体的最佳分离条件。【方法】以20～30日龄番木瓜无菌苗幼叶为材料，对原生质体分离过程中酶液组合、酶解时间、纯化离心速度（500～1500 rpm）及离心时间（6～10 min）进行探讨。【结果】随着酶解液中纤维素酶和果胶酶含量的提高，番木瓜原生质体产量逐渐升高，而其活力逐渐降低，其中以为2.0%纤维素酶+ 0.5%果胶酶组合的效果较好，解离时间以8 h为宜。随着酶解液中甘露醇浓度的升高，原生质体的产量呈现先增加后降低的趋势，在0.55 mol/L时达到最大（2.48×106个/gFW）。在悬浮纯化原生质体时，以1000 rpm离心6～8 min的效果较好。【结论】适宜原生质体分离的酶解液为2.0%纤维素酶+0.5%果胶酶+25 mmol/L MES+0.55 mol/L甘露醇，最适酶解时间为8 h；在原生质体纯化时，使用1000 rpm离心6~8 min，有利于获得产量及活力较高的原生质体。 |
| 关 键 词： | 番木瓜 幼叶 原生质体 分离 |
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