| 检测坦布苏病毒的双抗体夹心ELISA方法建立及初步应用 |
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| 引用本文： | 谢星星,李银,李祥瑞,赵冬敏,黄欣梅,韩凯凯,刘玉卓.检测坦布苏病毒的双抗体夹心ELISA方法建立及初步应用[J].畜牧与兽医,2014(5):24-30. |
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| 作者姓名： | 谢星星 李银 李祥瑞 赵冬敏 黄欣梅 韩凯凯 刘玉卓 |
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| 作者单位： | 南京农业大学动物医学院;江苏省农业科学院兽医研究所,农业部兽用生物制品工程技术重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31172345);江苏省自然科学基金(BK2012376);江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(12)5052] |
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| 摘 要： | 以鹅源坦布苏病毒JS804毒株制备的多克隆抗体为捕获抗体,抗鹅坦布苏病毒NS1蛋白的单克隆抗体4A9作为检测抗体,建立了检测坦布苏病毒的双抗体夹心ELISA方法。该方法的最佳反应条件为:兔抗鹅坦布苏病毒多克隆抗体的最适稀释度为1∶1 600,单克隆抗体的最适稀释度为1∶160,样品反应时间为1 h,酶标羊抗鼠二抗工作浓度为1∶5 000,以OD450nm≥0.245作为阳性判定标准。该方法的板间、板内重复性变异系数小于10%,病毒最低检测量为386.25TCID50/0.1 mL,与新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒(AIV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、鸭肝炎病毒(DHV)和鹅细小病毒(GPV)无交叉反应。应用该方法与RT-PCR方法同时检测22份临床样品,符合率达到86.36%。结果表明,建立的双抗体夹心ELISA方法具有特异性好、灵敏性高和重复性好等优点,可用于坦布苏病毒的快速检测。
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| 关 键 词： | 坦布苏病毒 鹅 双抗体夹心ELISA |
Establishment of double antibody sandwich ELISA for detection of Tembusu virus and its preliminary application |
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| XIE Xingxing;LI Yin;LI Xiangrui;ZHAO Dongmin;HUANG Xinmei;HAN Kaikai;LIU Yuzhuo.Establishment of double antibody sandwich ELISA for detection of Tembusu virus and its preliminary application[J].Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2014(5):24-30. |
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| Authors: | XIE Xingxing;LI Yin;LI Xiangrui;ZHAO Dongmin;HUANG Xinmei;HAN Kaikai;LIU Yuzhuo |
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| Institution: | XIE Xingxing;LI Yin;LI Xiangrui;ZHAO Dongmin;HUANG Xinmei;HAN Kaikai;LIU Yuzhuo;College of Veterinary Medicine,Nanjing Agricultural University;Research Institute of Veterinary Medicine,Jiangsu Academy of Agricultural Sciences,Key Laboratory ofBiological Engineering and Technology of Veterinary Bio-Products,Ministry of Agriculture; |
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