4株IBDV分离株VP2基因的序列分析及原核表达 |
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引用本文: | 肖跃强,管宇,李书光,刘吉山,王金良,郭广君,沈志强.4株IBDV分离株VP2基因的序列分析及原核表达[J].畜牧与兽医,2010,42(4). |
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作者姓名: | 肖跃强 管宇 李书光 刘吉山 王金良 郭广君 沈志强 |
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作者单位: | 1. 山东省滨州畜牧兽医研究院,山东,滨州,256600 2. 山东省滨州畜牧兽医研究院,山东,滨州,256600;山东绿都生物科技有限公司,山东,滨州,256600 |
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基金项目: | 山东省滨州畜牧兽医研究院自主创新项目 |
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摘 要: | RT-PCR扩增获得4株鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)分离株(GT、HN、ZB、BZ)VP2基因并测序,序列分析结果表明:各基因全长均为1356bp,编码452个氨基酸残基;核苷酸、氨基酸序列同源性分别在93.2%~99.9%与93.6%~100%之间;除HN株与经典毒株Cu-1核苷酸同源性为95.5%外,其余3株均为95.6%;GT、HN、ZB及BZ株与VariantE株核苷酸同源性均为95.9%;该4株病毒与北欧、非洲、西亚、东南亚、东亚等地区于1998~2008年报道的超强毒株的核苷酸与氨基酸序列同源性均非常高。根据VP2蛋白氨基酸序列特征,HN、ZB、BZ株病毒皆为超强毒株(vvIBDV),GT株除254位氨基酸残基为变异株特征性的S(丝氨酸)外,其余均与超强毒株特征相符。以GT株VP2基因克隆至原核表达载体pBV220,转化大肠杆菌BL21(DE3),低温培养后42℃热诱导,并对诱导产物进行SDS-PAGE、Western-blot分析。结果显示,目的基因获得表达,并与阳性抗体具有良好的反应原性,为以VP2为基础的基因工程亚单位疫苗的研制奠定基础。
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关 键 词: | vvIBDV VP2基因 序列分析 原核表达 Western-blot |
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