| 猪圆环病毒2型cap基因与猪γ-干扰素基因双表达载体的构建及稳定表达 |
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| 引用本文： | 娄忠子,杨彬,兰喜,李学瑞,李志勇,殷相平,李宝玉,柳纪省.猪圆环病毒2型cap基因与猪γ-干扰素基因双表达载体的构建及稳定表达[J].畜牧与兽医,2010,42(12). |
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| 作者姓名： | 娄忠子 杨彬 兰喜 李学瑞 李志勇 殷相平 李宝玉 柳纪省 |
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| 基金项目： | 科研院所社会公益研究专项 |
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| 摘 要： | 通过PCR方法分别从含有猪圆环病毒2型(PCV-2)核衣壳蛋白(Cap)基因和猪,γ-干扰素(PoIFN-γ)基因的重组克隆载体pMD18-PCV-2Cap和pMD18-PoIFN-γ中扩增出Cap和PoIFN-γ的基因,将两基因亚克隆到真核表达载体pBudCE4.1中,构建重组真核双表达载体pBud-IFNPCV。重组质粒转染BHK-21细胞后进行Zeocin~(TM)抗性筛选建立细胞系,阳性细胞通过间接免疫荧光(IFA)和Western blot检测cap和PoIFN-γ在BHK-21细胞中的表达。结果显示,试验中筛选出1株Zeocin~(TM)抗性阳性BHK-21细胞,cap和PoIFN-γ均在该细胞中获得稳定高效表达,这将为猪圆环病毒病的防治提供新的方法。
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒2型 核衣壳蛋白 猪γ-干扰素 双表达载体 抗性筛选 |
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