| 猪YTHDF2蛋白原核表达及多克隆抗体的制备 |
| |
| 引用本文： | 黄童,杜柳阳,张宇,顾金燕,周继勇.猪YTHDF2蛋白原核表达及多克隆抗体的制备[J].畜牧与兽医,2019(8):90-95. |
| |
| 作者姓名： | 黄童 杜柳阳 张宇 顾金燕 周继勇 |
| |
| 作者单位： | 南京农业大学动物医学院;浙江大学农业部动物病毒学重点实验室 |
| |
| 摘 要： | YTH家族蛋白2(YTH domain-containing family protein,YTHDF2)作为一种m~6A修饰的结合蛋白,可对底物mRNA的剪接,翻译,降解等过程进行调控。本研究通过RT-PCR首次获得了猪YTHDF2编码基因序列,全长1 743 bp,编码580个氨基酸,基因进化树分析显示该基因在各物种间保守性较高。将猪YTHDF2编码基因克隆至原核表达载体pET-28a (+)中,重组质粒pET-28a (+)-YTHDF2在大肠杆菌BL-21菌株中进行原核表达,成功获得了大量带His标签的猪YTHDH2重组蛋白,大小约70 kD。以纯化的重组蛋白为抗原免疫新西兰大白兔制备猪YTHDF2多抗血清,ELISA结果表明制备的兔抗猪YTHDF2多抗血清效价为1:204 800,间接免疫荧光(IFA)和Western blot试验均表明该多克隆抗体具有良好的反应性和特异性。猪YTHDF2基因序列的获得及多克隆抗体的制备为进一步研究YTHDF2在猪mRNA m~6A甲基化过程中的生物学功能奠定了基础。
|
| 关 键 词： | 猪YTHDF2 原核表达 多克隆抗体 |
Prokaryotic expression of porcine YTHDF2 protein and preparation of polyclonal antibody |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
|
