| 基因芯片检测5种动物冠状病毒的初步研究 |
| |
| 引用本文： | 李健,谢爱织,陈沁,王巧全,熊炜,张建武,王权,胡永强.基因芯片检测5种动物冠状病毒的初步研究[J].畜牧与兽医,2010,42(12). |
| |
| 作者姓名： | 李健 谢爱织 陈沁 王巧全 熊炜 张建武 王权 胡永强 |
| |
| 摘 要： | 采用蔗糖密度梯度离心,纯化浓缩犬冠状病毒(CCV)、猫冠状病毒(FCV)、猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪呼吸道冠状病毒(PRCV)的细胞培养物,分别设计7,17,11,10和4对引物,构建了49个基因片段的克隆。煮沸裂解法制备质粒DNA,回收PCR扩增产物,点制冠状病毒基因芯片。抽提病毒总RNA,利用Cy3-dCTP随机渗入反转录PCR标记,与芯片进行杂交检测,淘汰交叉的克隆片段。结果表明:克隆CCV1,CCV2,CCV5和CCV7可特异诊断CCV,克隆FCV6,FCV7,FCV8和FCV9可特异诊断FCV,克隆FIPV2,FIPV7,FIPV8和FIPV9可特异诊断FIPV,克隆PRCV1,PRCV2和PRCV3可特异诊断PRCV,克隆TGEV3,TGEV4,TGEV5和TGEV6可特异诊断TGEV。将这些特异克隆扩增片段重新点制基因芯片,与病毒PCR产物杂交,未发现交叉现象。基因芯片检测比传统PCR敏感1000倍,可有效应用于这5种动物冠状病毒的检测与区分。
|
| 关 键 词： | 冠状病毒 基因芯片 杂交 检测 |
Simultaneous detection of five animal coronavirus by genechip hybridization |
| |
| LI Jian,XIE Ai-zhi,CHEN Qin,WANG Qiao-quan,XIONG Wei,ZHANG Jian-wu,WANG Quan,HU Yong-qiang.Simultaneous detection of five animal coronavirus by genechip hybridization[J].Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2010,42(12). |
| |
| Authors: | LI Jian XIE Ai-zhi CHEN Qin WANG Qiao-quan XIONG Wei ZHANG Jian-wu WANG Quan HU Yong-qiang |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | coronavirus genechip hybridization detection |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
