布莱凯特黑牛CRTC1、CRTC3基因克隆测序及表达分析 |
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引用本文: | 吴磊,刘瑞莉,柏学进,刘贤勋,吕娟娟,肖超柱,董雅娟.布莱凯特黑牛CRTC1、CRTC3基因克隆测序及表达分析[J].中国畜牧杂志,2021(3):119-125. |
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作者姓名: | 吴磊 刘瑞莉 柏学进 刘贤勋 吕娟娟 肖超柱 董雅娟 |
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作者单位: | 青岛农业大学动物胚胎工程中心;山东省黑牛繁育工程技术研究中心;山东布莱凯特黑牛科技股份有限公司 |
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基金项目: | 山东省现代农业产业技术体系牛产业创新团队建设(668/2216030)。 |
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摘 要: | 为研究布莱凯特黑牛CRTC1、CRTC3基因序列和表达情况及其与生长发育的关系,本实验运用克隆测序方法检测CRTC1、CRTC3基因CDS区,并进行生物信息学分析;运用qRT-PCR技术检测不同组织和不同月龄的mRNA相对表达量;并用免疫组化技术对蛋白进行定位分析。结果显示:克隆测序获得的布莱凯特黑牛CRTC1、CRTC3基因CDS区分别为1773 bp和1725 bp,分别编码590、575个氨基酸;运用生物信息学分析后发现CRTC1、CRTC3结构稳定性差,为亲水性、偏酸性蛋白;进化树显示与牛、瘤牛、山羊和绵羊的同源性高(>80%),蛋白互作网络图显示CRTC1、CRTC3蛋白与FoxO基因家族、AMPK家族等基因相互作用强。qRT-PCR结果显示CRTC1、CRTC3基因分别在睾丸和脂肪中mRNA相对表达量最高(P<0.01),在肌肉组织中亦有表达。在肌肉组织中,CRTC1、CRTC3基因mRNA相对表达量随着年龄的增加逐渐降低;免疫组化显示CRTC1、CRTC3蛋白主要在肌肉组织的肌原纤维中表达。以上结果表明,CRTC1、CRTC3基因调控肌纤维生长发育,进而参与肌肉生长发育相关调节。
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关 键 词: | 布莱凯特黑牛 CRTC1基因 CRTC3基因 实时荧光定量PCR 免疫组化 |
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