应用SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR溶解曲线检测鹌鹁源性成分 |
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引用本文: | 张慧霞,宗卉,吴建平,张利平.应用SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR溶解曲线检测鹌鹁源性成分[J].中国畜牧杂志,2010,46(17). |
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作者姓名: | 张慧霞 宗卉 吴建平 张利平 |
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基金项目: | 深圳出入境检验检疫局科研项目,甘肃省人事厅555人才科研项目 |
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摘 要: | 根据GenBank中的鹌鹑线粒体DNA(mtDNA)12S RNA基因保守序列,用Primer5.0软件设计了1对针对鹌鹑的特异性扩增引物,建立了一种检测鹌鹑动物源性成分的SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR方法.通过SYBRGreen Ⅰ实时荧光PCR反应,同时进行溶解曲线和Tm值分析.结果表明:只有鹌鹑样品在Tm值为82℃下有特异的溶解曲线峰,而参考物种鸽子、鸡、鸭、鹅、鸵鸟、鹧鸪、牛、羊、猪、马、驴、鱼和空白对照,则无特异的溶解曲线峰,说明该引物只对鹌鹑有特异性.测序结果表明,鹌鹑组织SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR产物的核苷酸序列与GenBank中检索到的相应序列相吻合;该方法的检测灵敏度为0.001%.
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关 键 词: | 检测 鹌鹑源性成分 SYBR Green Ⅰ荧光PCR 线粒体DNA |
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