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鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的融合表达及兔抗血清的制备
引用本文:孙芬芬,宇文延青,高宏雷,高玉龙,祁小乐,高立,王笑梅.鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的融合表达及兔抗血清的制备[J].中国动物传染病学报,2009,17(4).
作者姓名:孙芬芬  宇文延青  高宏雷  高玉龙  祁小乐  高立  王笑梅
作者单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001
基金项目:"十一五"国家科技支撑计划 
摘    要:以鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)Gt株基因组RNA为模板,通过RT-PCR扩增VP2基因,经EcoR Ⅰ/Sal Ⅰ酶双酶切处理后与经相同酶切处理的pET30a原核表达载体连接,将酶切、PCR及序列鉴定正确的阳性重组子转化E. coli DE3菌,经IPTG诱导,表达的VP2蛋白通过Ni-NTA树脂纯化后,免疫新西兰白兔,制备兔抗血清,并对其进行间接ELISA、IFA和Western blot分析.SDS-PAGE分析表明,在IVFG诱导下成功表达了约为50 kDa的His-VP2融合蛋白;间接ELISA检测制备的兔抗血清效价在1:25 600以上;IFA及Western-blot分析结果表明,其可特异性结合真核表达的VP2蛋白以及IBDV全病毒.研究结果提示,免抗VP2血清可用于VP2蛋白及病毒的检测,为进一步研究IBDV分子生物学功能提供了物质基础.

关 键 词:鸡传染性法氏囊病病毒  融合表达  兔抗血清

FUSION EXPRESSION OF VP2 GENE OF INFECTIOUS BURSAL DISEASE VIRUS AND THE PREPARATION OF RABBIT ANTISERUM AGAINST VP2 PROTEIN
SUN Fen-fen,YU WEN Yan-qing,GAO Hong-lei,GAO Yu-long,QI Xiao-le,GAO Li,WANG Xiao-mei.FUSION EXPRESSION OF VP2 GENE OF INFECTIOUS BURSAL DISEASE VIRUS AND THE PREPARATION OF RABBIT ANTISERUM AGAINST VP2 PROTEIN[J].Chinese Journal of Animal Infectious Diseases,2009,17(4).
Authors:SUN Fen-fen  YU WEN Yan-qing  GAO Hong-lei  GAO Yu-long  QI Xiao-le  GAO Li  WANG Xiao-mei
Abstract:
Keywords:VP2
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