| 古典H1N1亚型猪流感病毒反向遗传操作平台的建立 |
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| 引用本文： | 汪秀会,宫晓倩,刘晓敏,阮宝阳,李泽君,周艳君,童光志,于海.古典H1N1亚型猪流感病毒反向遗传操作平台的建立[J].中国动物传染病学报,2014(6):13-17. |
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| 作者姓名： | 汪秀会 宫晓倩 刘晓敏 阮宝阳 李泽君 周艳君 童光志 于海 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院上海兽医研究所 |
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| 基金项目： | 国家青年自然科学基金(31201916);上海市自然科学基金青年项目(12ZR1453500);中国农业科学院创新工程团队“动物流感病毒病原生态学” |
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| 摘 要： | 利用RT-PCR技术扩增古典H1N1亚型猪流感病毒A/Swine/Guangdong/1/2011株的8个目的基因片段,分别克隆至双向转录表达载体p BD上。将8个重组质粒纯化后共转染293T细胞,48 h后收集上清,接种MDCK细胞。当细胞出现明显病变时,收集MDCK细胞上清,其血凝效价为1:64,与原始野生株血凝效价一致;提取拯救病毒的RNA并进行8个目的片段扩增及序列分析,测序结果显示与野生株病毒相同,表明病毒拯救成功。古典H1N1亚型猪流感病毒反向遗传操作平台的成功建立,不仅为探索流感病毒致病机理、感染机制及功能研究奠定了基础,同时也为H1N1亚型猪流感病毒新型疫苗的研制开辟了新的途径。
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| 关 键 词： | RT-PCR H1N1亚型 猪流感病毒 反向遗传 病毒拯救 |
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