欧洲类禽H1N1亚型猪流感病毒反向遗传操作平台的建立 |
| |
引用本文: | 汪琪,杨海明,汪秀会,刘晓敏,王帅勇,姚云,朱世强,单同领,童武,周艳君,李国新,郑浩,高飞,姜一峰,童光志,于海.欧洲类禽H1N1亚型猪流感病毒反向遗传操作平台的建立[J].中国动物传染病学报,2018(3). |
| |
作者姓名: | 汪琪 杨海明 汪秀会 刘晓敏 王帅勇 姚云 朱世强 单同领 童武 周艳君 李国新 郑浩 高飞 姜一峰 童光志 于海 |
| |
作者单位: | 中国农业科学院上海兽医研究所 |
| |
摘 要: | 为了构建猪流感病毒A/swine/Tian Jin/6/2013(H1N1)的反向遗传操作技术平台,通过RT-PCR技术分别扩增了欧洲类禽H1N1亚型猪流感病毒的8个基因片段,并分别连接至双向转录表达载体p BD上。纯化8个重组质粒,共转染到293T细胞。54 h后收集上清,并接种到MDCK细胞。待细胞病变明显时,进行血凝试验检测收集到的上清,测得血凝效价为1∶32。测定拯救病毒的全基因组序列,结果显示,在核苷酸序列上,拯救病毒与野生病毒完全一致。细胞病变情况显示,拯救毒株与野生毒株无明显差别。本研究成功拯救了欧洲类禽H1 N1亚型猪流感病毒,为猪流感病毒的致病机理、基因功能研究以及H1N1亚型猪流感病毒新型疫苗的研发奠定了基础。
|
本文献已被 CNKI 等数据库收录! |
|