| 葡萄卷叶病毒3和茎痘病毒双重PCR检测方法的建立及初步应用 |
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| 引用本文： | 李升,李玲玉,乔光,龙天文,王嘉福.葡萄卷叶病毒3和茎痘病毒双重PCR检测方法的建立及初步应用[J].中国果业信息,2019,48(1). |
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| 作者姓名： | 李升 李玲玉 乔光 龙天文 王嘉福 |
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| 作者单位： | 贵州大学农业生物工程研究院,贵州大学生命科学学院;贵州大学农业生物工程研究院,贵州大学生命科学学院;贵州大学农业生物工程研究院,贵州大学生命科学学院;贵州大学农业生物工程研究院,贵州省铜仁学院 |
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| 基金项目： | 本研究由贵州省农业攻关项目(黔科合农NY字(2014)3057号),贵州2015年度千层次创新型人才项目和贵州省2015年度“三区”科技人才项目共同资助。 |
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| 摘 要： | 针对葡萄中卷叶病毒3 (grapevine leaf roll virus 3, GLRaV-3)和茎痘病毒(grapevine rupestris stem pitting-associated virus, GRSPaV)的发生情况,建立了同时检测GLRaV-3和GRSPaV的双重PCR技术,结果表明,建立的双重PCR反应体系最适退火温度为56.1℃,20 μL PCR反应体系中最适引物浓度为0.1 μmol/L；该方法能够检测出GLRaV-3和GRSPaV的cDNA最低浓度分别为0.99 pg/μL和99.43 ng/μL,且特异性良好。应用该双重PCR方法检测了来自贵州凯里和遵义地区的30份不同品种葡萄样品。所测样品中,当地种植的三种葡萄被GLRaV-3的病毒侵染率为100%。将当地检测出的病毒核苷酸序列进行克隆测序后,其中GLRaV-3与美国分离株(AJ748523)相似度最高,为99.82%；GRSPaV与巴西分离株(KT008370)相似度最高,为99.08%。经田间试验,该双重PCR方法可以应用于葡萄GLRaV-3和GRSPaV的检测。
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| 关 键 词： | 葡萄卷叶病毒3 葡萄茎痘病毒 多重PCR |
| 收稿时间： | 2018/10/16 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2018/10/30 0:00:00 |
Establishing and Applying the multiplex PCR to detect grapevine leaf roll virus and grapevine rupestris stem pitting-associated virus |
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| Li Lingyu,Qiao Guang,Long Tianwen and Wang Jiafu.Establishing and Applying the multiplex PCR to detect grapevine leaf roll virus and grapevine rupestris stem pitting-associated virus[J].China Fruit News,2019,48(1). |
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| Authors: | Li Lingyu Qiao Guang Long Tianwen and Wang Jiafu |
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| Institution: | Guizhou University School of Life Sciences,Guizhou Guiyang;Guizhou University Institute of Agricultural Bioengineering,Guizhou Guiyang,Guizhou University School of Life Sciences,Guizhou Guiyang;Guizhou University Institute of Agricultural Bioengineering,Guizhou Guiyang,Guizhou University School of Life Sciences,Guizhou Guiyang;Guizhou University Institute of Agricultural Bioengineering,Guizhou Guiyang,Guizhou Tong Ren college |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | GLRaV-3 GRSPaV Multiplex PCR |
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