| 杂花苜蓿SRAP-PCR反应体系的正交优化 |
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| 引用本文： | 周良彬,卢欣石,赖黎丽.杂花苜蓿SRAP-PCR反应体系的正交优化[J].草地学报,2010,18(3):345-351. |
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| 作者姓名： | 周良彬 卢欣石 赖黎丽 |
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| 作者单位： | 北京林业大学草业科学系,北京,100083;新疆农业大学草业与环境科学学院,新疆,乌鲁木齐,830052 |
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| 基金项目： | "863"计划项目，国家科技支撑项目 |
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| 摘 要： | 利用正交设计L16(45)对杂花苜蓿(Medicago varia Martin.)SRAP-PCR反应体系的5因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP、引物)在4个水平上进行优化试验,旨在建立一套适用于苜蓿属(Medicago L.)种质资源的SRAP标记技术体系.结果表明:各因素对PCR反应结果都有显著影响,由F值可知,dNTP的量对反应结果影响最大,其次是Taq酶的量,模版DNA浓度的影响最小,各因素水平的变化对PCR反应的影响依次为:dNTP>Taq酶>Mg2+>引物>模板DNA;筛选出各反应因素的最佳水平,建立杂花苜蓿SRAP-PCR反应的最佳体系(25 μL )为:dNTP 2 μL( 0.20 mmol·L-1),Taq DNA 聚合酶0.3 μL (1.50 U), Mg2+3 μL(1.50 mmol·L-1),上、下游引物各1 μL (0.40 μmol·L-1),50 ng模板DNA1 μL,10×PCR buffer 2.5 μL (不含Mg2+).这一优化体系的建立,为今后利用SRAP标记技术进行苜蓿属植物遗传图谱构建、遗传多样性分析及种质资源鉴定等研究奠定了技术基础.
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| 关 键 词： | 杂花苜蓿 SRAP PCR 正交设计 优化 |
Optimization for SRAP-PCR System of Medicago varia Martin.Based on Orthogonal Design |
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| ZHOU Liang-Bin,LU Xin-Shi,LAI Li-li.Optimization for SRAP-PCR System of Medicago varia Martin.Based on Orthogonal Design[J].Acta Agrestia Sinica,2010,18(3):345-351. |
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| Authors: | ZHOU Liang-Bin LU Xin-Shi LAI Li-li |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SRAP PCR |
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