| 紫花苜蓿ISSR-PCR反应体系的建立与优化 |
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| 引用本文： | 王瑜,袁庆华.紫花苜蓿ISSR-PCR反应体系的建立与优化[J].草地学报,2007,15(3):212-215. |
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| 作者姓名： | 王瑜 袁庆华 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100094 |
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| 摘 要： | 通过优化影响紫花苜蓿(Medicago sativa L.)ISSR-PCR的主要参数,建立适于紫花苜蓿的ISSR反应体系和扩增程序.在20μL体系中各反应物的最适含量为:15 ng模板DNA,0.2 mmol/L dNTP,0.4 μmol/L ISSR引物,0.8 U Taq DNA聚合酶,2 μL 10×PCR Buffer,1.5 mmol/L MgCl2,2.5%去离子甲酰胺.PCR扩增程序为:94℃预变性4 min,94℃变性30 s,62℃(62℃～58℃)退火45 s,72℃延伸1 min 45 s,共11个循环,每个循环退火温度降1℃;94℃变性30 s,52℃(52℃～48℃)退火45 s,72℃延伸1 min 45 s,共24个循环;72℃延伸5 min,25℃保温.
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| 关 键 词： | 紫花苜蓿 ISSR PCR反应体系 优化 紫花苜蓿 反应体系 建立与优化 Alfalfa System Reaction ISSR Optimization 保温 温度降 循环退火 延伸 预变性 去离子甲酰胺 Buffer 聚合酶 dNTP 模板 最适含量 反应物 |
| 文章编号： | 1007-0435（2007）03-0212-04 |
| 收稿时间： | 2006-09-20 |
| 修稿时间： | 2006-09-202007-03-04 |
Establishment and Optimization of ISSR Reaction System for Alfalfa |
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| WANG Yu,YUAN Qing-hua.Establishment and Optimization of ISSR Reaction System for Alfalfa[J].Acta Agrestia Sinica,2007,15(3):212-215. |
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| Authors: | WANG Yu YUAN Qing-hua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Alfalfa ISSR PCR reaction system Optimization |
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