| 1.1kb、2.7kb、3.0kb鸡输卵管组织特异性启动子的克隆及细胞评价 |
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| 引用本文： | 赵颖慧,王伟,李越,周长良,臧凤霞,孟庆文,陈洪岩.1.1kb、2.7kb、3.0kb鸡输卵管组织特异性启动子的克隆及细胞评价[J].中国家禽,2014(9):6-11. |
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| 作者姓名： | 赵颖慧 王伟 李越 周长良 臧凤霞 孟庆文 陈洪岩 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; |
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| 基金项目： | 中央级公益性科研院所基本科研业务费(1610302014022);“十二五”农村领域国家科技计划课题(2011AA100305-2);地方科技攻关计划课题(PC13S16) |
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| 摘 要： | 鸡卵清蛋白基因启动子是指导外源基因高效特异性表达的理想调控区,利用卵清蛋白启动子驱动外源蛋白大量表达,需要包含组织特异性相关序列。本研究以海兰白鸡的基因组为模板,采用PCR扩增了1.1 kb、2.7 kb和3.0 kb的卵清蛋白启动子区,置换pcDNA6.2-GFP中CMV启动子序列,构建了真核表达载体pOV1.1 kb-GFP、pOV2.7 kb-GFP、pOV3.0 kb-GFP;转染原代输卵管上皮细胞和中国仓鼠卵巢细胞(CHO),PCR、RT-PCR证明重组载体能够整合到细胞基因组内,并进行转录;倒置荧光显微镜下观测到绿色荧光蛋白表达;启动子表达效率由高到低依次是CMV启动子、1.1 kb、2.7 kb、3.0 kb卵清蛋白启动子。研究结果为瞬时表达模型的建立和输卵管生物反应器的研究奠定基础。
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| 关 键 词： | 鸡 输卵管 生物反应器 卵清蛋白基因 启动子 |
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