H9N2亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体的制备及生物学特性分析

1994年以来,H9N2亚型禽流感病毒(AIV)在中国广泛流行,给养禽业造成了巨大损失。病毒已表现出明显的遗传和抗原多样性,但是对于其抗原性的演化研究较少。本研究选取2014年H9N2亚型AIV分离株A/chicken/Jiangsu/TM118/2014制备针对其血凝素的单克隆抗体,共获得8株稳定分泌针对血凝素蛋白的杂交瘤细胞,分别命名为4B6、3F2、6D11、6B5、1H6、1G6、2D11、3D2,腹水HI效价在2~(11)~2~(19)之间;特异性鉴定结果显示,8株单克隆抗体仅特异针对H9亚型禽流感病毒,而与其他亚型禽流感病毒及其他感染家禽的常见病毒不反应;广谱性分析显示,6D11可以与所选毒株的绝大部分反应,其它7株与不同年代、不同谱系的反应性不同;8株单克隆抗体均能与感染H9亚型禽流感病毒的MDCK细胞特异性反应,呈现绿色荧光。本研究所获得的单克隆抗体可在H9亚型禽流感病毒的抗原性位点分析、流行病学监测及临床检测中发挥重要作用。