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| 鸡蛋清溶菌酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达研究 | |
| 引用本文： | 权志中,张丞斌,余荣,刘长江.鸡蛋清溶菌酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达研究[J].饲料工业,2007,28(24):18-22. |
| 作者姓名： | 权志中 张丞斌 余荣 刘长江 |
| 作者单位： | 1. 沈阳农业大学食品学院,110161,沈阳市东陵区东陵路120号 2. 浙江工业大学生物与环境工程学院 3. 杭州康德权科技有限公司 |
| 摘 要： | 研究从鸡输卵管组织提取细胞总RNA,根据Gene Bank中已发表的鸡溶菌酶基因序列,设计合成特异引物,合成cDNA序列,并以此为模版,PCR扩增鸡溶菌酶基因。用Xho I和Xba I对LYZ基因的PCR产物和真核表达载体pPIC6αA进行双酶切后转化到大肠杆菌(DH5α)中,构建成为真核重组表达载体pPIC6αA-LYZ。该载体经PstXI酶切线性化后,以电击转化方法导入到毕赤酵母宿主菌X-33中,经Blasticidin抗性筛选,得到鸡溶菌酶基因重组毕赤酵母菌株;甲醇96h(发酵罐诱导100h)诱导表达,经Wetern-blot检测分析,基因重组工程菌株摇瓶诱导表达溶菌酶的表达量约为4mg/l,发酵罐诱导表达的表达量约为10mg/l。 |
| 关 键 词： | 溶菌酶 克隆 表达 毕赤酵母 |
| 收稿时间： | 2007-11-12 |
| 修稿时间： | 2007年11月12 |
Research on hen egg white lysozyme gene cloning and expression in pichia pastoris |
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