鹦鹉喙羽症病毒Cap蛋白的原核表达与纯化 |
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引用本文: | 郭学俊,纪钟书,陈冬杰,盖新娜,常建宇.鹦鹉喙羽症病毒Cap蛋白的原核表达与纯化[J].中国兽医杂志,2018(6). |
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作者姓名: | 郭学俊 纪钟书 陈冬杰 盖新娜 常建宇 |
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作者单位: | 中国农业大学动物医学院 |
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摘 要: | 鹦鹉喙羽症病毒(PBFDV)是圆环病毒科圆环病毒属的成员,可引起多个品种鹦鹉的急性死亡或者羽毛脱落和喙变形。病毒基因组中的ORF1和ORF2分别编码病毒复制相关蛋白(Rep protein)和衣壳蛋白(Cap protein)。Cap蛋白是圆环病毒的主要结构蛋白,也是其主要的免疫保护性蛋白。本试验应用PCR技术选择性扩增PBFDV Cap蛋白抗原表位集中区域的基因片段,并将其克隆入原核表达载体pGEX-6p-1中,诱导表达截短的Cap蛋白。SDS-PAGE及质谱鉴定结果显示,融合表达的CapT蛋白约45 kDa,切胶纯化后的蛋白浓度约1. 6 mg/mL。该Cap蛋白的成功获得为PBFDV治疗用阳性血清制备及亚单位疫苗的开发奠定了必要的物质基础。
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