猪伪狂犬病毒GDSH2020株的分离鉴定及其主要毒力基因分子特征

为了解目前广东省猪伪狂犬病毒(PRV)野毒株的特点，本试验于2020年采集广东省四会市某猪场临床疑似PRV感染发病猪的组织样品，运用PCR、细胞分离培养、间接免疫荧光和病毒生长曲线测定等方法进行病原的分离和鉴定，随后将获得的病原接种新西兰白兔分析其致病性，并对该病原的主要毒力基因进行克隆、测序和遗传进化分析。结果显示：样品经PCR检测可扩增出PRV特异性阳性条带；接种PK-15细胞后出现明显的细胞病变效应(CPE),纯化后将获得病原命名为GDSH2020;生长曲线结果显示，在感染细胞60 h后病毒滴度即达到最高(10^6.625 TCID₅₀/mL)。GDSH2020株接种新西兰白兔2 d后即出现体温升高、注射部位奇痒、啃咬等症状，并在接毒后3～4 d全部死亡。GDSH2020株gB、gC、gD、gE和TK基因氨基酸序列分析结果显示，与参考毒株(Kaplan、Becker等)相比，gE基因氨基酸序列在第48、496位分别插入1个天冬氨酸，与国内变异株特征一致；而gC基因氨基酸序列有4个位点突变(S102P、H103R、A336V和T393A);...