| 大肠杆菌β-内酰胺酶耐药基因blaTEM,blaSHV,blaCTX-M三重PCR检测方法建立 |
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| 引用本文： | 田国宝,王红宁,张安云,张毅,杨鑫,徐昌文.大肠杆菌β-内酰胺酶耐药基因blaTEM,blaSHV,blaCTX-M三重PCR检测方法建立[J].中国兽医杂志,2013,49(1):3-5. |
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| 作者姓名： | 田国宝 王红宁 张安云 张毅 杨鑫 徐昌文 |
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| 作者单位： | 四川大学生命科学学院动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室生物资源与生态环境教育部重点实验室,四川成都,610064 |
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| 基金项目： | 国家“十一五”科技支撑计划“动物产品兽药残留安全控制技术研究”(2006BAK02A19) |
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| 摘 要： | 本研究以我国大肠杆菌中常见的3种β-内酰胺酶耐药基因(bla,TEM blasHV和blaCTX-M)作为目的基因,设计3对特异性引物,建立了blaTEM,bla SHV和blaCTX-M耐药基因三重PCR检测方法.三重PCR反应体系为:10×PCR缓冲液2.5 μL,MgCl2(25 mmol/L) 2.5 μL,dNTP (2.5 mmol/L)4 μL,blaTEM,blasHV和blaCTX-M上下游引物(25 μmol/L)分别为0.25 μL、0.5 μL、1.0μL,Taq DNA聚合酶(2.5 U/μL)0.4μL,模板2.5μL,反应总体积为25 μL.反应参数为:94℃5 min,94℃50 s,55℃55 s,72℃1 min,32个循环,72℃延伸5 min.本方法的建立为大肠杆菌中β-内酰胺酶耐药基因的快速检测及分子流行病学调查提供了新的手段.
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| 关 键 词： | 大肠杆菌 三重PCR β-内酰胺酶 耐药基因 |
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