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鸡BCs原代培养贴壁性影响因素分析
引用本文:王坤,张佰忠,易康乐,蒋隽,王庆桥,李昊帮,燕海峰.鸡BCs原代培养贴壁性影响因素分析[J].家畜生态学报,2015,36(2):61-66.
作者姓名:王坤  张佰忠  易康乐  蒋隽  王庆桥  李昊帮  燕海峰
作者单位:1. 湖南光大牧业科技有限公司,湖南长沙410131;湖南农业大学动物科学技术学院,湖南长沙410128
2. 湖南光大牧业科技有限公司,湖南长沙,410131
3. 湖南农业大学动物科学技术学院,湖南长沙,410128
4. 湖南天心黄鸡育种有限公司,湖南长沙,410143
5. 湖南光大牧业科技有限公司,湖南长沙410131;湖南天心黄鸡育种有限公司,湖南长沙410143
基金项目:国家国际科技合作专项,湖南省科技计划,长沙市科技计划
摘    要:试验从鸡第X期胚胎中分离囊胚,使用含10%FBS、青霉素和链霉素的高糖DMEM培养基,对鸡X期BCs进行无饲养层培养。分别在6h、12h、24h对细胞贴壁性进行评价,探究分离方法、离散程度、培养细胞密度、离心损伤对细胞培养的影响。结果表明:滤纸环法在分离胚胎上效果最好;细胞离散程度上,吹打20下效果最好,与吹打30下差异不显著(P0.05),二者与吹打40下差异均显著(P0.05);接种密度上,1×103个/mL和5×103个/mL两组差异不显著(P0.05),这两组与其它组,以及其它组之间差异均显著(P0.05),密度为1×105个/mL时效果最好,5×104个/mL次之,但密度为5×104个/mL时更方便观察;离心处理上,都离心5 min的条件下,5 590×g和1 398×g组差异不显著(P0.05),但其与224×g处理组差异显著(P0.05),其中5 590×g组效果最佳。因此,滤纸环法分离胚胎,吹打20下离散细胞,使用5 590×g离心5min,稀释成5×104个/mL的密度,接种到96孔板培养,可以获得较好的结果。

关 键 词:  X期BCs  原代培养  贴壁性

Factors Affecting the Adherent Rate of Primary Cultured Chicken Blastodermal Cells
WANG Kun,ZHANG Bai-zhong,YI Kang-le,JIANG Jun,WANG Qing-qiao,LI Hao-bang,YAN Hai-feng.Factors Affecting the Adherent Rate of Primary Cultured Chicken Blastodermal Cells[J].Acta Ecologae Animalis Domastici,2015,36(2):61-66.
Authors:WANG Kun  ZHANG Bai-zhong  YI Kang-le  JIANG Jun  WANG Qing-qiao  LI Hao-bang  YAN Hai-feng
Institution:WANG Kun;ZHANG Bai-zhong;YI Kang-le;JIANG Jun;WANG Qing-qiao;LI Hao-bang;YAN Hai-feng;Hunan Guangda Animal Husbandry Science and Technology Co.,Ltd.;College of Animal Science and Technology,Hunan Agriculture University;Hunan Tianxing Yellow Chicken Breeding Co.,Ltd.;
Abstract:
Keywords:chicken  blastodermal cells (BCs) at stage X  primary cell culture  cell adherent rate
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