| Rv3872/CFP-10/ESAT-6融合蛋白的人工合成及表达 |
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| 引用本文： | 王楠,付延军,赵子丰,王春华,王晓锋.Rv3872/CFP-10/ESAT-6融合蛋白的人工合成及表达[J].吉林畜牧兽医,2013(6):33-35. |
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| 作者姓名： | 王楠 付延军 赵子丰 王春华 王晓锋 |
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| 作者单位： | 1. 吉林省动物疫病预防控制中心,吉林长春,130062
2. 吉林市农科院,吉林吉林市,132000
3. 吉林正业生物制品股份有限公司,吉林吉林市,132000 |
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| 摘 要： | 根据牛分枝杆菌AF2122/97基因组中Rv3872、CFP-1O和ESAT-6全长基因序列,以柔性linke(rG4S)3,将三基因序列进行串联,形成表达基因盒(Rv3872-CFP1O-ESAT6,RCE),人工合成并克隆于PUC57转移载体上(PUC57-RCE)。经EcoRI和HindIII双酶切PUC57-RCE,回收纯化RCE片段,与经过相同双酶切的pET-28a载体,于16℃水浴连接过夜,连接产物转化大肠杆菌DH5a感受态细胞,重组质粒经培养鉴定,测序结果证实插入的REC片段序列编码和方向与预期一致。在优化的诱导条件下表达蛋白,分段收集样本,并各取少量进行SDS-PAGE,经Western-blot分析显示,融合蛋白RCE具有较好的免疫原性,与阳性牛血清在35kDa位置处有明显的反应带。
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| 关 键 词： | 奶牛结核病 融合蛋白 Rv3872/CFP-10/ESAT-6 人工合成 表达 |
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