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马立克病肿瘤相关抗原间接ELISA检测方法的建立
引用本文:穆杨,王玉东,张彦明,李崴,李玉清,郑增忍,高敬,童德文.马立克病肿瘤相关抗原间接ELISA检测方法的建立[J].中国兽医科技,2006,36(7):538-542.
作者姓名:穆杨  王玉东  张彦明  李崴  李玉清  郑增忍  高敬  童德文
作者单位:[1]西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100 [2]农业部动物检疫所,山东青岛266032
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30371067);霍英东教育基金资助项目(91033)
摘    要:用自制并纯化的马立克病肿瘤相关表面抗原(MATSA)免疫SPF级BALB/c小鼠制备阳性对照抗体,以SPF级BALB/c小鼠血清为阴性对照抗体,筛选间接ELISA检测MATSA抗体的最佳反应条件。结果,包被液为0.1mol/L pH9.6的碳酸盐缓冲液,抗原包被浓度为4μg/mL,封闭液为含10g/LBSA的PBST,抗血清稀释比例为1:800,酶标抗体稀释比例为1:1200,酶标抗体作用时间为37℃温育45min,底物作用时问为37℃温育15min,终止液为2mol/LH2SO4,洗涤4次,每次1min为最佳反应条件。将建立的方法应用于MATSA单克隆抗体研制过程中阳性克隆的筛选,成功获得了MATSA的单克隆抗体,表明该优化条件为间接ELISA检测MATSA抗体的最佳反应条件。

关 键 词:马立克病肿瘤相关表面抗原  间接ELISA  条件  筛选
文章编号:1673-4696(2006)07-0538-05
收稿时间:2006-03-06
修稿时间:2006-05-31

Development of an indirect ELISA for the detection of MATSA
MU Yang , WANG Yu-dong ,ZHANG Yan-ming , LI Wei ,LI Yu-qing, ZHENG Zeng-ren, GAO Jing , TONG De-wen.Development of an indirect ELISA for the detection of MATSA[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2006,36(7):538-542.
Authors:MU Yang  WANG Yu-dong  ZHANG Yan-ming  LI Wei  LI Yu-qing  ZHENG Zeng-ren  GAO Jing  TONG De-wen
Abstract:
Keywords:MATSA  indirect ELISA  condition  screening
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