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猪圆环病毒2型SYBR Green I荧光定量PCR检测方法的建立
引用本文:于新友,李天芝,王金良,李峰,沈志强.猪圆环病毒2型SYBR Green I荧光定量PCR检测方法的建立[J].猪业科学,2015(4):71-73.
作者姓名:于新友  李天芝  王金良  李峰  沈志强
作者单位:1. 山东绿都生物科技有限公司,山东 滨州,256600
2. 山东省滨州畜牧兽医研究院,山东 滨州,256600
3. 山东绿都生物科技有限公司,山东 滨州 256600; 山东省滨州畜牧兽医研究院,山东 滨州 256600
基金项目:省校合作计划项目,黔科合LH字[2014]7670号
摘    要:为了建立猪圆环病毒2型(PCV2)SYBR Green I荧光定量PCR检测方法,采用PCR扩增PCV2 ORF2基因242 bp片段,并克隆入pMD18-T载体中,以纯化的重组质粒为模板作荧光定量PCR扩增,建立了PCV2荧光定量PCR检测方法,该方法检测灵敏度可达1.2×101拷贝/μL,与猪圆环病毒1型(PCV1)、猪瘟病毒(CSFV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、乙型脑炎病毒(JEV)核酸均不发生扩增反应,具有很好的特异性和重复性。结果表明:建立的PCV2实时荧光定量PCR检测方法具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床PCV2的检测。

关 键 词:猪圆环病毒2型  ORF2基因  SYBR  Green  I  荧光定量PCR
收稿时间:1/5/2015 12:00:00 AM
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