口蹄疫病毒VP1基因C末端串连表达及其抗体ELISA方法的初步建立 |
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引用本文: | 彭贵青,陈焕春,钱平,李祥敏,洪琦,顾贫.口蹄疫病毒VP1基因C末端串连表达及其抗体ELISA方法的初步建立[J].畜牧兽医学报,2004,35(6):670-674. |
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作者姓名: | 彭贵青 陈焕春 钱平 李祥敏 洪琦 顾贫 |
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作者单位: | 华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室,武汉,430070 |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划"863"(2001 AA 213051);武汉科技攻关计划(20026002082) |
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摘 要: | 口蹄疫病毒主要免疫原性基因VP1的B细胞和T细胞抗原表位位于其C末端,参照Taiwanse97(AJ294928)设计了1对特异性引物,扩增出VPl基因C末端。序列分析表明:其C末端长285bp,编码74个氨基酸,与O/HKN/12/91、O/PEN/TAW/99核苷酸和氨基酸同源性分别为95%、93%和96%、93%;利用同尾酶Xho I、Sall将VP1基因C末端串连起来;再将单拷贝和双拷贝C末端基因插入到原核表达载体pGEX-KG后,转化BL21(DE3),在IPTG诱导下获得表达,经Western blot检测证实表达产物具有活性。以表达产物包被ELISA板,初步建立了特异、敏感的ELISA诊断方法。同时用表达产物免疫Balb/c小鼠,能产生一定的抗O型口蹄疫病毒的抗体。
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关 键 词: | 抗体 表达产物 末端 ELISA方法 VP1基因 T细胞抗原 表位 口蹄疫病毒 O型口蹄疫 特异性引物 |
文章编号: | 0366-6964(2004)06-0670-05 |
Gene Cloning and Expression of the VP1 and 2VP1 Gene of FMDV |
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Abstract: | |
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Keywords: | FMDV antigen site expression immunity |
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