| 鸡Piwi蛋白的亚细胞定位研究 |
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| 引用本文： | 戴爱琴,常国斌,陈蓉,张颖,阴彦辉,马腾,李建超,陈国宏.鸡Piwi蛋白的亚细胞定位研究[J].畜牧兽医学报,2013(1):15-22. |
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| 作者姓名： | 戴爱琴 常国斌 陈蓉 张颖 阴彦辉 马腾 李建超 陈国宏 |
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| 作者单位： | 扬州大学动物科学与技术学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31172199;30972088);江苏省自然科学基金(BK2009190);江苏高校优势学科建设工程资助项目 |
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| 摘 要： | 通过构建2种真核表达载体比较Piwi蛋白在真核细胞中的表达部位,为进一步研究Piwi蛋白的生物学功能提供依据。采用RT-PCR方法克隆了狼山鸡睾丸组织中Piwi基因CDS,构建含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的融合表达载体pEGFP-C1-Piwi,脂质体PEI介导基因转染NIH-3T3细胞,同时构建pcDNA3.1-Piwi真核表达载体,采用细胞间接免疫荧光方法检测Piwi蛋白在NIH-3T3细胞的表达部位。结果表明,成功克隆出公鸡Piwi基因的全序列CDS,大小为2 604bp,与GenBank中预计的序列基本一致;融合表达载体pEGFP-C1-Piwi在整个细胞中都有表达;而间接免疫荧光方法检测到pcDNA3.1-Piwi载体主要在NIH-3T3细胞质中表达。Piwi蛋白主要在细胞质中表达,采用间接免疫荧光方法比EGFP报告基因法更为可靠,适合目的蛋白的亚细胞定位研究。
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| 关 键 词： | Piwi蛋白 真核表达 亚细胞定位 绿色荧光蛋白 间接免疫荧光 |
Sub-cellular Localization of Chicken Piwi Protein |
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| DAI Ai-qin,CHANG Guo-bin,CHEN Rong,ZHANG Ying,YIN Yan-hui,MA Teng, LI Jian-chao,CHEN Guo-hong.Sub-cellular Localization of Chicken Piwi Protein[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2013(1):15-22. |
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| Authors: | DAI Ai-qin CHANG Guo-bin CHEN Rong ZHANG Ying YIN Yan-hui MA Teng LI Jian-chao CHEN Guo-hong |
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| Institution: | (College of Animal Science and Technology,Yangzhou University,Yangzhou 225009,China) |
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