牦牛StAR基因克隆及其生物信息学与组织表达特性的研究

旨在克隆获得牦牛StAR基因编码序列（CDS）并进行生物信息学分析，探究其mRNA组织表达特性。本研究以屠宰场采集的成年母牦牛心、肝、脾、肺、肾、卵巢、输卵管、子宫组织（n=5），不同年龄（胎牛、1岁、2岁）牦牛的卵巢（n=3），不同发情周期（卵泡期、黄体期）的牦牛卵巢（n=3），黄体期黄牛的卵巢（n=3）及实验室冻存的牦牛颗粒细胞为研究材料。以牦牛黄体期卵巢cDNA为模板，用逆转录PCR克隆StAR基因，并使用MEGA7.0和ExPASy-ProtParam等软件分析其生物信息学特性；采用实时荧光定量PCR技术分析牦牛StAR基因组织表达特性。结果发现，StAR基因CDS区长858 bp，编码285个氨基酸，StAR蛋白总体带正电荷，属于碱性亲水稳定蛋白，无跨膜结构及信号肽，主要存在于细胞质和线粒体； StAR基因具有较高的保守性，符合物种进化规律。牦牛StAR基因在卵巢表达水平最高（P<0.01），且2岁时卵巢表达水平极显著高于胎牛和1岁龄（P<0.01），黄体期卵巢表达水平极显著高于卵泡期（P<0.01）；黄体期黄牛卵巢中StAR基因的表达量极显著高于牦牛（P<0.01）；在颗粒细胞的体外培养过程中StAR基因表达量逐渐上升，在培养24 h时达到高峰（P<0.01），随后显著降低。综上所述，StAR基因序列较为保守，在牦牛卵巢组织中表达最高，且表达水平随年龄与卵巢周期而变化，提示StAR基因可能参与牦牛卵巢及黄体功能相关的繁殖调控。

Cloning and Analysis of Bioinformatics and Tissue Expression Characteristics of Yak StAR Gene