| 基于M基因的新城疫病毒实时荧光定量RT-PCR的建立及其对临床样品中新城疫病毒检测的研究 |
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| 引用本文： | 曹军平,胡顺林,吴双,刘慧谋,刘晓文,王晓泉,吴艳涛,刘秀梵.基于M基因的新城疫病毒实时荧光定量RT-PCR的建立及其对临床样品中新城疫病毒检测的研究[J].畜牧兽医学报,2009,40(7). |
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| 作者姓名： | 曹军平 胡顺林 吴双 刘慧谋 刘晓文 王晓泉 吴艳涛 刘秀梵 |
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| 作者单位： | 扬州大学兽医学院,扬州,225009 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目，国家科技支撑计划 |
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| 摘 要： | 根据新城疫病毒M基因的保守序列,设计合成1对引物和TaqMan探针,以作者实验室构建并保存的鹅源新城疫病毒zJ1株M基因阳性重组质粒为标准品模板建立荧光定量PCR标准曲线,结合ABI公司的7300型荧光定量PCR仪,建立了一种敏感、特异、重复性好的快速检测新城疫病毒核酸载量的TaqMan荧光定量RT-PCR方法.该方法在106～101拷贝范围内具有良好的线性关系,可检测到初始模板中3拷贝·μL-1的病毒核酸,与传统的病毒分离方法具有相近的敏感性,二者对500份临床禽泄殖腔棉拭样品检测结果阳性数、阴性数符合率分别为90.0%、99.8%.经临床应用表明:荧光定量PCR的建立为早期诊断禽新城疫病毒、定量分析禽新城疫病毒感染程度奠定了基础.
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| 关 键 词： | 新城疫病毒 荧光定量RT-PCR 探针 |
Development of a Real-Time Fluorescent Quantitative RT-PCR Based on M Gene of Newcastle Disease Virus(NDV)to Detect NDV in Clinical Samples |
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| CAO Jun-ping,HU Shun-lin,WU Shuang,LIU Hui-mo,LIU Xiao-wen,WANG Xiao-quan,WU Yan-tao,LIU Xiu-fan.Development of a Real-Time Fluorescent Quantitative RT-PCR Based on M Gene of Newcastle Disease Virus(NDV)to Detect NDV in Clinical Samples[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2009,40(7). |
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| Authors: | CAO Jun-ping HU Shun-lin WU Shuang LIU Hui-mo LIU Xiao-wen WANG Xiao-quan WU Yan-tao LIU Xiu-fan |
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