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Asia1型口蹄疫病毒含RSD受体识别位点感染性克隆的构建与病毒拯救
引用本文:李平花,白兴文,孙普,卢曾军,曹伟军,谢宝霞,吴润,殷宏,刘在新.Asia1型口蹄疫病毒含RSD受体识别位点感染性克隆的构建与病毒拯救[J].畜牧兽医学报,2011,42(2).
作者姓名:李平花  白兴文  孙普  卢曾军  曹伟军  谢宝霞  吴润  殷宏  刘在新
作者单位:1. 甘肃农业大学动物医学院,兰州,730070;中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,国家口蹄疫参考实验室,兰州,730046
2. 中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,国家口蹄疫参考实验室,兰州,730046
3. 甘肃农业大学动物医学院,兰州,730070
基金项目:国家”973”项目(2005CB523201); 国家“十一五”科技支撑计划项目(2006BAD06A12)
摘    要:口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)具有高的突变率和很强的适应性,在环境条件变化时会迅速从准种种群中选择变异株来适应新的环境,这些变异株包括在RGD受体结合基序内部或附近氨基酸的替换。FMDV Asia1/JS/China/05株经不同宿主传代后产生含RSD和RDD受体识别基序的变异株,为了研究含RDD受体识别基序的FMDV在受体结合位点内1个氨基酸的变化是否影响感染性病毒子的产生,作者利用已构建的含RDD受体结合位点的FMDV Asia1/JS/China/05株的全长感染性cDNA克隆为骨架,采用融合PCR方法,构建了该毒株含RSD受体位点的全长cDNA克隆pFMDV-RSD。线性化的pFMDV-RSD重组质粒和表达T7RNA聚合酶的真核质粒pcDNAT7P共转染BHK-21细胞,56 h后可观察到典型的FMDV致细胞病变效应。对收获的病毒分别进行序列测定、间接免疫荧光试验、电子显微镜观察和乳鼠致病性分析,结果证实该毒株细胞受体位点1个氨基酸的替换不影响活病毒的拯救。该试验为进一步研究含RSD受体结合位点FMDV的生物学特性奠定了基础。

关 键 词:口蹄疫病毒  RSD受体结合位点  感染性cDNA克隆  病毒拯救  

Construction and Virus Rescue of an Infectious Clone of Type Asia 1 Foot-and-Mouth Disease Virus Containing RSD Receptor Recognition Site
LI Ping-hua,BAI Xing-wen,SUN Pu,LU Zeng-jun,CAO Wei-jun,XIE Bao-xia,WU Run,YIN Hong,LIU Zai-xin.Construction and Virus Rescue of an Infectious Clone of Type Asia 1 Foot-and-Mouth Disease Virus Containing RSD Receptor Recognition Site[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2011,42(2).
Authors:LI Ping-hua  BAI Xing-wen  SUN Pu  LU Zeng-jun  CAO Wei-jun  XIE Bao-xia  WU Run  YIN Hong  LIU Zai-xin
Institution:LI Ping-hua1,2,BAI Xing-wen2,SUN Pu2,LU Zeng-jun2,CAO Wei-jun2,XIE Bao-xia2,WU Run1,YIN Hong2,LIU Zai-xin2 (1.College of Veterinary Medicine,Gansu Agricultural University,Lanzhou 730070,China,2.State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology,Key Laboratory of Animal Virologyof Ministry of Agriculture,National Foot-and-Mouth Disease Reference Laboratory,Lanzhou Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Lanzhou 730046,China)
Abstract:Foot-and-Mouth Disease Virus(FMDV) has the high mutation rates and exhibits an important potential for adaptations.The new variants will be generated upon environment change to adapt new environmental conditions,these variants contained one or several amino acid replacements within the capsid protein,including the RGD cell receptor-binding motif.Following serial passages of FMDV Asia1/JS/China/05 isolates under different host condition,the viruses which contained an RSD and RDD sequence in the cell receptor...
Keywords:foot-and-mouth disease virus  RSD cell receptor binding motif  infectious cDNA clones  virus rescue  
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