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猪流行性腹泻病毒N蛋白的真核表达及其亚细胞定位的初步分析
引用本文:吕茂杰,冯力,时洪艳,陈建飞,孙东波,申识川,崔小辰,王承宝,范秀萍.猪流行性腹泻病毒N蛋白的真核表达及其亚细胞定位的初步分析[J].畜牧兽医学报,2009,40(5).
作者姓名:吕茂杰  冯力  时洪艳  陈建飞  孙东波  申识川  崔小辰  王承宝  范秀萍
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家莺点实验室猪传染病研究室,哈尔滨,150001
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家莺点实验室猪传染病研究室,哈尔滨,150001;东北农业大学,哈尔滨,150030
基金项目:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所院所长基金 
摘    要:以构建的含有编码猪流行性腹泻病毒CV777株核衣壳蛋白(N)基因的阳性质粒pMDT-18-N为模板,用含有KpnⅠ和XhoⅠ酶切位点的上、下游引物扩增获得N基因,该PCR产物经KpnⅠ和XhoⅠ双酶切后定向克隆到经相同双酶切的真核表达载体pcDNA3.1(+)中,经过酶切鉴定和测序鉴定,将构建的重组质粒命名为pcD-NA3.1(+)-N,且未发现碱基的缺失和插入。用脂质体法将pcDNA3.1(+)-N转染Vero E6细胞,在48 h后,以针对猪流行性腹泻病毒核衣壳蛋白的鼠源多抗血清进行Western blot、免疫荧光检测,并运用共聚焦显微镜分析N蛋白的亚细胞定位。结果表明N基因能在真核细胞Vero E6中正确表达,共聚焦分析结果表明N蛋白在细胞质和细胞核中定位。

关 键 词:猪流行性腹泻病毒  核衣壳蛋白  真核表达  亚细胞定位

Eukaryotic Expression and Subcellular Localization Preliminary Analysis of Porcine Epidemic Diarrhea Virus Nucleocapsid Protein
LV Mao-jie,FENG Li,SHI Hong-yan,CHEN Jian-fei,SUN Dong-bo,SHEN Shi-chuan,CUI Xiao-chen,WANG Cheng-bao,FAN Xiu-ping.Eukaryotic Expression and Subcellular Localization Preliminary Analysis of Porcine Epidemic Diarrhea Virus Nucleocapsid Protein[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2009,40(5).
Authors:LV Mao-jie  FENG Li  SHI Hong-yan  CHEN Jian-fei  SUN Dong-bo  SHEN Shi-chuan  CUI Xiao-chen  WANG Cheng-bao  FAN Xiu-ping
Abstract:
Keywords:
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