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应用酵母双杂交系统初步筛选IBDV VP2结合蛋白
引用本文:袁维峰,吴保明,张鑫宇,张泉,孙怀昌.应用酵母双杂交系统初步筛选IBDV VP2结合蛋白[J].畜牧兽医学报,2009,40(6).
作者姓名:袁维峰  吴保明  张鑫宇  张泉  孙怀昌
作者单位:扬州大学兽医学院,扬州,225009
摘    要:用RT-PCR扩增VP2 cDNA并克隆入诱饵载体pSos,与鸡法氏囊cDNA文库中分离的质粒DNA共转化cdc25H,筛选阳性酵母克隆;用酵母质粒DNA转化大肠杆菌,提取质粒再分别与诱饵载体pSosVP2共转化酵母细胞,利用酵母双杂交系统对阳性克隆进行验证.对阳性克隆的插入片段进行序列分析,根据生物信息学分析结果初步确定IBDV VP2结合蛋白编码基因.结果显示,经酵母双杂交共筛选出48个候选阳性克隆,分别转化酵母菌,经酵母双杂交验证后,获得阳性克隆19个.进一步的序列分析显示,在19个插入序列中,共编码8种不同的多肽,分别是Ras超家族中的RRAS2、Rit1和N-Ras,肿瘤相关蛋白TCTP和PARP14,抗病毒Mx蛋白,LAMB3蛋白以及蛋白激酶PRKX.VP2候选结合蛋白的获得为IBDV受体、诱导细胞凋亡或逃逸宿主抗病毒机制等研究奠定了基础.

关 键 词:鸡传染件法氏囊病毒  鸡法氏囊cDNA文库  酵母双杂交系统  VP2结合蛋白

Preliminary Screening Candidate IBDV VP2-binding Proteins by Yeast Two-hybrid System
YUAN Wei-feng,WU Bao-ming,ZHANG Xing-yu,ZHANG Quan,SUN Huai-chang.Preliminary Screening Candidate IBDV VP2-binding Proteins by Yeast Two-hybrid System[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2009,40(6).
Authors:YUAN Wei-feng  WU Bao-ming  ZHANG Xing-yu  ZHANG Quan  SUN Huai-chang
Abstract:
Keywords:
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