| 检测鸡毒支原体抗体的间接ELISA方法和HI试验方法的建立及初步应用 |
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| 引用本文： | 陈杨,孟林春,郭梦娇,张成成,薄宗义,楚电峰,曹永忠,吴艳涛,张小荣.检测鸡毒支原体抗体的间接ELISA方法和HI试验方法的建立及初步应用[J].畜牧兽医学报,2023(5):2062-2072. |
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| 作者姓名： | 陈杨 孟林春 郭梦娇 张成成 薄宗义 楚电峰 曹永忠 吴艳涛 张小荣 |
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| 作者单位： | 1. 扬州大学兽医学院江苏省动物重要疫病预防控制协同创新中心;2. 扬州大学农业科技发展研究院教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室;3. 青岛易邦生物工程有限公司动物基因工程疫苗国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 财政部和农业农村部：国家现代农业产业技术体系资助项目(CARS-40-K16)；;国家重点研发计划“科技助力经济2020”重点专项(SQ2020YFF0426460)；;动物基因工程疫苗国家重点实验室开放课题(AGVSKL-ZD-202003)； |
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| 摘 要： | 本研究旨在建立一种检测鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)抗体的间接ELISA方法，结合HI试验，为MG感染的监测和净化提供一套有效的组合技术方案。以原核表达的VlhA 3.03重组蛋白(rVlhA)作为包被抗原，使用单一稀释法构建了关于血清抗体滴度与1∶500血清稀释度处S/P值的回归方程lg(抗体滴度)=1.257×lg(1∶500处S/P值)+3.709,R2=0.917 6,S/P临界值为0.32,临界滴度是1 200。经验证，rVlhA-ELISA方法具有良好的特异性、重复性，最低能检出1∶2 000稀释的阳性血清。选择国内MG分离株SH/2020-1作为血凝抑制抗原建立HI试验方法。使用rVlhA-ELISA方法联合HI试验进行血清样品检测，IDEXX-MG方法作为对照，借助RT-qPCR方法监测MG感染情况。结果表明rVlhA-ELISA方法和IDEXX-MG监测的血清抗体趋势与HI复核结果均一致；rVlhA-ELISA与HI联合判定结果与IDEXX-MG符合率可达91.53%。上述结果显示，本研究建立的rVlhA-E...
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| 关 键 词： | 鸡毒支原体 VlhA蛋白 抗体检测 间接ELISA |
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