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乙型脑炎病毒NS1基因重组伪狂犬病毒的构建
引用本文:徐高原,王祥,陈焕春,徐晓娟,李自力,何启盖,吴斌.乙型脑炎病毒NS1基因重组伪狂犬病毒的构建[J].畜牧兽医学报,2004,35(2):192-197.
作者姓名:徐高原  王祥  陈焕春  徐晓娟  李自力  何启盖  吴斌
作者单位:1. 华中农业大学动物医学院病毒室,武汉,430070
2. 湖北省公安厅刑侦总队,武汉,430070
基金项目:教育部重大项目(编号0113),湖北省重点科技攻关项目(2001AA201B02)。
摘    要:设计1对引物从含有乙型脑炎病毒NS1基因的质粒pNS1上亚克隆NS1基因,将NS1基因插入到中间转移载体pUSK中,获得重组中间转移质粒pUSK—NS1。将pUSK—NS1与伪狂犬病毒Ea株TK/gG/LacZ^ 突变株基因组共转染真核细胞IBRS-2,通过空斑纯化得到了乙型脑炎病毒NS1基因重组伪狂犬病毒株TK/gG^-/NS^ 1。经检测,重组病毒能表达具有生物活性的NS1蛋白。该重组病毒可作为猪乙型脑炎和伪狂犬病双价基因工程疫苗用毒株。

关 键 词:乙型脑炎病毒  NS1基因重组  伪狂犬病毒  中间转移载体
文章编号:0366-6964(2004)02-0192-06

Construction of Recombinant Virus Strain TK /gG /NS1+ Recombinized by Pseudorabies Virus Ea Mutant Strain TK /gG /LacZ+ and NS1 Gene of Japanese Encephalitis Virus
XU Gao- yuan,WANG Xiang,CHEN Huan- chun,XU Xiao- juan,Li Zi- li,HE Qi- gai,WU Bin.Construction of Recombinant Virus Strain TK /gG /NS1+ Recombinized by Pseudorabies Virus Ea Mutant Strain TK /gG /LacZ+ and NS1 Gene of Japanese Encephalitis Virus[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2004,35(2):192-197.
Authors:XU Gao- yuan  WANG Xiang  CHEN Huan- chun  XU Xiao- juan  Li Zi- li  HE Qi- gai  WU Bin
Abstract:One pair of primers was designed to subclone NS1 from pTNS1 into general transfer vector pUSK.A co- transfection experiment was carried out with the purified pUSK- NS1 and the genome of TK~- /gG~- /LacZ~ mutant of pseudorabies virus Ea strain in IBRS- 2.By plaque purifications and PCR detection,we acquired recombinant virus TK~- /gG~- /NS1~ .Western- blot and ELISA showed that NS1 protein could be expressed in PK- 15 cell infected with TK~- /gG~- /NS1~ .This recombinant virus strain can be used for the study of duel- valence vaccine of JEV and PRV.
Keywords:Japanese encephalitis virus  NS1 gene  Pseudorabies virus  Recombinant virus
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