N蛋白磷酸化位点突变影响猪繁殖与呼吸综合征病毒的复制及亚基因组的转录

为探究猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）的N蛋白磷酸化修饰是否对病毒的复制及亚基因组的转录产生影响，将XH-GD PRRSV N蛋白的已知磷酸化位点Ser-105和Ser-120分别或同时突变为Ala，拯救突变病毒，命名为A105、A120、A105-120，测定其生长曲线和亚基因组的转录水平。结果显示：突变病毒在MARC-145的病毒复制速率与滴度显著低于亲本毒株（P<0.01或P<0.05），而在原代PAMs复制速率降低（P<0.01），不影响病毒最终的滴度。突变毒株的基因组RNA（genomic RNA，gRNA）转录水平显著降低（P<0.01或P<0.05），磷酸化位点突变能显著降低长链亚基因组mRNA（subgenomic RNA，sgmRNA）2、3的转录（P<0.01或P<0.05），但短链sgmRNA4、5表达量随时间呈增加趋势。以gRNA表达量为基准对各亚基因组表达量进行整体分析，发现N蛋白磷酸化显著影响了sgmRNA4和sgmRNA5的表达（P<0.01或P<0.05）。结果提示，N蛋白磷酸化位点突变影响PRRSV的复制及亚基因组转录。