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基因修饰的鸡新城疫病毒HN基因DNA疫苗免疫效力评价
引用本文:石星明,贺笋,王玫,杨桂花,曾伟伟,崔红玉,童光志,王云峰.基因修饰的鸡新城疫病毒HN基因DNA疫苗免疫效力评价[J].畜牧兽医学报,2009,40(10).
作者姓名:石星明  贺笋  王玫  杨桂花  曾伟伟  崔红玉  童光志  王云峰
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室,哈尔滨,150001
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室,哈尔滨,150001;河北北方学院动物科技学院动物医学系,张家口,075131
3. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室,哈尔滨,150001;中国农业科学院上海兽医研究所,上海,200241
摘    要:为了评价基因修饰对提高DNA疫苗免疫效果的影响,将NDV F48E9株HN基因进行密码子优化和信号肽替换,修饰后的基因命名为SoptiHN,将HN和SoptiHN基因分别克隆至pVAX 1和含CpG-ODN刺激序列的载体pVAX 1-CpG中,共获得pV-SoptiHN、pVC-SoptiHN、pV-HN和pVC-HN 4种质粒.将4种质粒股四头肌多点注射3周龄SPF鸡,每只鸡200 μg,以PBS为非免疫对照;一免后3周以相同的剂量加强免疫,二免后2周以103EID50NDV的F48E9强毒株进行攻毒,计算发病率、死亡率以及排毒情况.试验期间每周采集血清进行HI抗体的检测,同时采集抗凝血分离外周血淋巴细胞,分析免疫后各试验组IFN-y和IL-18的变化情况.结果表明,疫苗免疫1周后,所有免疫组均能产生抗NDV的HI抗体,pV-SoptiHN和pVC-SoptiHN组最高,与其他组差异显著;pVC-SoptiHN和pVC-HN质粒免疫组IFN-γ和IL-18表达水平要略高于pV-SoptiHN和pV-HN质粒免疫组.攻毒结果显示,pV-SoptiHN与pVC-SoptiHN免疫组的死亡保护率均为71%,排毒检出率均为25%,而pV-HN和pVc-HN免疫组的保护率均为50%,排毒检出率分别为50%和44%,pVAX1、pVAX1-CpG和PBS对照组攻毒后的死亡率均为100%,排毒检出率均为100%,pV-SoptiHN与pVC-SoptiHN免疫组的排毒时间与其他5组相比有所缩短.以上结果表明,修饰后的HN基因可以诱导鸡产生更强烈的免疫反应,获得更好的保护效率.

关 键 词:基因修饰  DNA疫苗  免疫保护

Evaluation of Immune Efficacy with Gene Modified DNA Vaccines Based on HN Gene of Newcastle Disease Virus
Abstract:
Keywords:NDV
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