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鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的原核表达及生物学活性分析
引用本文:谭兵,王红宁,张毅,张安云,樊汶樵.鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的原核表达及生物学活性分析[J].畜牧兽医学报,2009,40(5).
作者姓名:谭兵  王红宁  张毅  张安云  樊汶樵
作者单位:1. 四川农业大学,动物医学院,雅安,625014
2. 四川农业大学,动物医学院,雅安,625014;四川大学,生命科学院四川大学"动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室",成都,610064
3. 四川大学,生命科学院四川大学"动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室",成都,610064
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划) 
摘    要:通过PCR方法扩增不含信号肽的鸡GM-CSF成熟蛋白基因,克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建原核表达质粒p32GM-CSF,通过IPTG诱导重组鸡GM-CSF蛋白表达,经镍离子亲和层析纯化后,用MTT法检测表达重组蛋白的生物学活性,并制备兔抗鸡GM-CSF多克隆抗体。结果表明成功地构建了p32GM-CSF原核表达质粒,SDS-PAGE结果显示表达的重组蛋白约34 ku,主要以包涵体形式表达,纯化后得到高纯度目的蛋白。West-ern Blot结果表明,该重组蛋白能与制备的抗鸡GM-CSF抗体特异性结合。MTT试验证实,该重组蛋白具有明显增强鸡骨髓细胞增殖的生物学活性;这些研究结果表明,表达的重组chGM-CSF蛋白及其多克隆抗体拥有相应的生物学功能,这将为进一步研究鸡GM-CSF蛋白的生物学功能及其应用奠定基础。

关 键 词:  粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子  原核表达  生物学活性

Prokaryotic Expression and Purification of Bioactivity Analysis of Chicken Granulocyte Macrophage Clony Stimulating Factor(GM-CSF)
TAN Bing,WANG Hong-ning,ZHANG Yi,ZHANG An-yun,FAN Wen-qiao.Prokaryotic Expression and Purification of Bioactivity Analysis of Chicken Granulocyte Macrophage Clony Stimulating Factor(GM-CSF)[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2009,40(5).
Authors:TAN Bing  WANG Hong-ning  ZHANG Yi  ZHANG An-yun  FAN Wen-qiao
Abstract:
Keywords:
本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录!
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