马杜霉素在鸡组织中残留检测方法的研究 Ⅰ酶联免疫吸附测定(ELISA)

本文用混合酸酐法和活化酯法合成４种马杜霉素结合抗原。用其中一种作免疫原，免疫家兔产生抗体；用其余三种作包被原，探讨不同包被原用于ＥＬＩＳＡ检测马杜霉素残留时，对其灵敏度（Ｉ５０）和方法回收率的影响。试验结果表明，马杜霉素结合抗原免疫家兔制备的抗体对马杜霉素具有很高的特异性、亲合性和选择性。在间接竞争ＥＬＩＳＡ中，使用Ｍ－Ｃ６－ＯＶＡ（ＡＥ）、Ｍ－ＯＶＡ（ＭＡ）和Ｍ－ＯＶＡ（ＡＥ）作包被原时，马杜霉素标准工作曲线的Ｉ５０值分别为３２３、９７５和８８０ｎｇ／ｍｌ，这证明Ｍ－Ｃ６－ＯＶＡ（ＡＥ）作包被原能大大提高ＥＬＩＳＡ检测的灵敏度。添加回收率试验测得鸡各组织样本回收率为７７７％～１０４３％，变异系数为３８％～１８０％，检测极限为３０～８０μｇ／ｋｇ。