| 猪圆环病毒2型CaP蛋白的表达及在ELISA中的初步应用 |
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| 引用本文： | 赵玲,朱玲,郭万柱,徐志文,漆信桥,李凤勤.猪圆环病毒2型CaP蛋白的表达及在ELISA中的初步应用[J].畜牧兽医学报,2011,42(6). |
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| 作者姓名： | 赵玲 朱玲 郭万柱 徐志文 漆信桥 李凤勤 |
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| 作者单位： | 四川农业大学动物生物技术中心,雅安,625014 |
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| 基金项目： | 四川省科技厅应用基础项目，"长江学者和创新团队发展计划"创新团队项目 |
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| 摘 要： | 本研究旨在建立以PCV2 Cap蛋白为包被抗原的间接ELISA检测方法,构建猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因原核表达质粒pET32a-ORF2并转化至Rosetta菌,在1.0 mmol·L-1 IPTG和37℃条件下诱导下,Cap蛋白获得高效表达,Western blot检测证实其具有免疫反应活性,以纯化的蛋白为抗原建立了检测猪圆环病毒2型抗体的间接ELISA方法.结果表明抗原最适包被浓度为2.16μg·mL-1;血清最佳稀释度为1:40;抗原最佳包被条件为4℃过夜;最佳封闭条件为1%BSA 37℃1 h;血清反应时间为37℃30 min;酶标二抗最适作用时间为37℃45 min;底物最佳反应条件为37℃显色15 min.用该方法对四川省184份猪血清样品进行检测,总阳性率为80.98%(149/184),与商品化的PCV2 ELISA试剂盒得到的结果基本一致.本试验成功建立了PCv2血清抗体间接ELISA方法,具有较高的敏感性和特异性,可用于大规模的血清学检测.
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| 关 键 词： | 圆环病毒2型 Cap蛋白 间接ELISA |
Prokaryotic Expression of Cap Protein of Porcine Circovirus Type 2 Virus and Its Primary Application in ELISA |
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| ZHAO Ling,ZHU Ling,GUO Wan-zhu,XU Zhi-wen,QI Xin-qiao,LI Feng-qin.Prokaryotic Expression of Cap Protein of Porcine Circovirus Type 2 Virus and Its Primary Application in ELISA[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2011,42(6). |
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| Authors: | ZHAO Ling ZHU Ling GUO Wan-zhu XU Zhi-wen QI Xin-qiao LI Feng-qin |
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| Institution: | ZHAO Ling,ZHU Ling,GUO Wan-zhu,XU Zhi-wen,QI Xin-qiao,LI Feng-qin(Animal Biotechnology Center,Sichuan Agricultural University,YA'an 625014,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine circovirus type 2 Cap protein indirect ELISA |
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