捻转血矛线虫脂肪酶基因表达与生物学特性分析 |
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引用本文: | 周丽娜,胡孟娟,孙伟,李祥瑞,徐立新,宋小凯,严若峰.捻转血矛线虫脂肪酶基因表达与生物学特性分析[J].畜牧兽医学报,2018(3). |
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作者姓名: | 周丽娜 胡孟娟 孙伟 李祥瑞 徐立新 宋小凯 严若峰 |
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作者单位: | 南京农业大学动物医学院; |
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摘 要: | 选取捻转血矛线虫脂肪酶(Lipase)进行基因克隆、表达并对其生物学特性进行探究。PCR克隆捻转血矛线虫lipase基因,构建表达载体,获得融合蛋白质,采用Western blot检测该蛋白质的抗原特性;酯类酶解反应检测该融合蛋白质脂肪酶活性;实时定量PCR检测该基因在捻转血矛线虫不同发育阶段的转录情况;间接免疫荧光试验检验该抗原蛋白质在虫体组织的定位情况。结果表明,去除lipase基因信号肽序列后,基因片段长864bp,融合蛋白质大小50ku;该融合蛋白质在37℃左右、pH为7的条件下酶活力最高;雄性成虫lipase转录量相对虫体其他阶段最高;该抗原蛋白质主要表达于虫体表皮和肠腔。Lipase具有较好的抗原性,可能与捻转血矛线虫发育和宿主免疫调节有关,深入研究捻转血矛线虫Lipase的特性对寻找新的免疫保护性抗原和药物靶标具有意义。
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