| 鉴别显色培养基在奶牛乳房炎病原菌快速鉴定中的应用 |
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| 引用本文： | 吕天星,李松建,郝永清.鉴别显色培养基在奶牛乳房炎病原菌快速鉴定中的应用[J].畜牧兽医学报,2019(4):851-860. |
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| 作者姓名： | 吕天星 李松建 郝永清 |
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| 作者单位： | 内蒙古农业大学兽医学院微生物学与免疫学实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31460664) |
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| 摘 要： | 为研发用于奶牛乳房炎常见病原菌分离鉴定的鉴别显色培养基,并检验其与普通分离鉴定培养基辅以生化鉴定和16S rRNA核酸序列测定两种传统方法鉴定结果的一致性,笔者以生物信息学方法筛出各种属细菌的特异性酶、可作为唯一碳源发酵产酸的碳源,然后合成酶显色底物,连同碳源、酸碱指示剂制备显色培养基,将各种属标准菌株、野生型菌株涂布培养,评估菌落形态、菌落颜色及培养基基质颜色变化。采集隐性乳房炎(CMT法检测)及临床型乳房炎病例的牛奶样品(絮状物、凝块、清亮状或血乳)共计482份,用鉴别显色培养基和两种传统方法进行病原菌的分离、鉴定。鉴别显色培养基上菌落纯化后提取DNA用于16S rRNA序列扩增,产物送去测序(n=194)。以两种传统方法为参考,判定鉴别显色培养基鉴定病原菌的可靠性,用SAS 9.4的FREQ程序计算鉴别显色培养基的简单科恩κ系数。鉴别显色培养基上常见乳房炎病原菌不同种属的菌落形态和培养基基质颜色明显不同,肉眼即可辨别。鉴别显色培养基与两种传统方法鉴定结果的一致性参数分别为κ=0.70、κ=0.96。鉴别显色培养基能够作为常见奶牛乳房炎病原菌的标准鉴定方法。
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| 关 键 词： | 奶牛 乳房炎 病原菌快速鉴定 鉴别显色培养基 |
Application of a New On-farm Differential Chromogenic Medium for Fast Identification of Pathogens Associated with Mastitis in Milk of Dairy Cows |
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| LU Tianxing,LI Songjian,HAO Yongqing.Application of a New On-farm Differential Chromogenic Medium for Fast Identification of Pathogens Associated with Mastitis in Milk of Dairy Cows[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2019(4):851-860. |
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| Authors: | LU Tianxing LI Songjian HAO Yongqing |
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| Institution: | (Laboratory of Microbiology and Immunology,College of Veterinary Medicine,Inner Mongolia Agricultural University,Hohhot 010018,China) |
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| Abstract: | LU Tianxing;LI Songjian;HAO Yongqing(Laboratory of Microbiology and Immunology,College of Veterinary Medicine,Inner Mongolia Agricultural University,Hohhot 010018,China) |
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| Keywords: | dairy cow mastitis fast identification of pathogens differential chromogenic medium |
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