截短的传染性支气管炎病毒S1基因原核表达与分析

用RT-PCR方法扩增出传染性支气管炎病毒(IBV)H120S1基因468bp的目的片段,将该片段定向克隆到pQE-30原核表达载体中,并转化到大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中;经IPTG诱导进行表达,分别对IPTG的浓度和诱导时间进行优化,对表达的重组蛋白进行纯化,用Western blot验证该蛋白的活性。结果显示,成功构建了pQE-30-S1重组菌,经IPTG诱导,得到18ku左右大小的目的蛋白,IPTG最佳诱导浓度为0.2mmol/L,最适诱导时间为4h,该蛋白主要以包涵体形式存在,Western blot显示获得的重组蛋白能够与IBV多克隆抗体特异性反应。