JEV、PRRSV、PPV及PRV多重PCR检测方法的建立及应用 |
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引用本文: | 李斌,赵硕,周英宁,赵武,蒋家霞,何颖,郭旋,卢冰霞,林昌华,秦毅斌,段群棚,全琛宇,许心婷,陈婷婷,许艺兰,陈忠伟,张宁.JEV、PRRSV、PPV及PRV多重PCR检测方法的建立及应用[J].动物医学进展,2023(3):48-53. |
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作者姓名: | 李斌 赵硕 周英宁 赵武 蒋家霞 何颖 郭旋 卢冰霞 林昌华 秦毅斌 段群棚 全琛宇 许心婷 陈婷婷 许艺兰 陈忠伟 张宁 |
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作者单位: | 1. 广西兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室/农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室;2. 广西农垦永新畜牧集团新兴有限公司;3. 广西农垦永新畜牧集团金光有限公司;4. 广西农垦永新畜牧集团西江有限公司 |
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基金项目: | 柳州市科技计划项目(2020NACB0804);;南宁市科学研究与技术开发计划项目(20202090); |
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摘 要: | 为了建立一种能快速鉴别猪日本脑炎病毒(JEV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)的准确、高效的多重常规PCR检测方法,针对JEV、PRRSV、PPV、PRV基因保守区域合成特异性引物,优化后获得最优反应条件,对该方法特异性、敏感性、重复性进行了测定,并应用该方法对临床样品进行初步应用。结果显示,该方法对JEV、PRRSV、PPV、PRV可进行特异性扩增,对混合阳性质粒检测下限达2×106 copies/μL,对猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒、猪传染性胃肠炎病毒等相关病毒均无扩增,且重复性良好。用该方法检测51份2021年采集的广西区内组织样品,检出JEV、PRRSV、PPV、PRV阳性率分别为7.84%、50.98%、5.88%、23.53%,且存在多重混合感染的情况。所建立的多重PCR方法具有良好的特异性、敏感性及重复性,可应用于临床常见猪繁殖障碍性病毒病的快速诊断和监测预警,为猪繁殖障碍性病毒病提供了诊断技术支持。
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关 键 词: | 日本脑炎病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪细小病毒 猪伪狂犬病病毒 多重PCR |
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