猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪博卡病毒多重PCR检测方法的建立 |
| |
引用本文: | 焦洋,姜焱,王凯民,张常印,雷治海,唐泰山.猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪博卡病毒多重PCR检测方法的建立[J].动物医学进展,2013(8):71-75. |
| |
作者姓名: | 焦洋 姜焱 王凯民 张常印 雷治海 唐泰山 |
| |
作者单位: | 南京农业大学动物医学院;江苏出入境检验检疫局 |
| |
摘 要: | 根据GenBank登录的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因序列、猪流行性腹泻病毒(PEDV)M基因和猪博卡病毒(PBoV)NP1基因序列,设计合成3对引物。通过优化反应条件,对TGEV、PEDV RNA反转录获得的cDNA模板和PBoV的DNA模板进行多重PCR扩增,同时得到3条与试验设计相符的1 060bp(TGEV)、462bp(PEDV)及258bp(PBoV)特异性条带,建立了同时检测TGEV、PEDV和PBoV的多重PCR方法。结果表明,在同一PCR反应体系中,可以同时检测这3种病毒核酸片段,而对其他病毒的检测均为阴性;敏感性分析表明,该方法的最低检测限分别为35、20、10pg的核酸。采用该方法对60份临床样品进行检测,TEGV阳性率为1.6%,PEDV阳性率为6.7%,PBoV阳性率为21.7%,表明建立的方法可以应用于临床检测。
|
关 键 词: | 猪传染性胃肠炎病毒 猪流行性腹泻病毒 猪博卡病毒 多重PCR 检测 |
本文献已被 CNKI 等数据库收录! |
|