鸭IFN-γ mRNA实时荧光定量RT-PCR方法的建立 |
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引用本文: | 谢秀兰,汤承,杨发龙,岳华.鸭IFN-γ mRNA实时荧光定量RT-PCR方法的建立[J].动物医学进展,2008,29(5):17-20. |
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作者姓名: | 谢秀兰 汤承 杨发龙 岳华 |
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作者单位: | 1. 西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都,610041;川北医学院微生物与免疫学教研室,四川南充,637000 2. 西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都,610041 |
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摘 要: | 为建立检测鸭IFN-γmRNA表达的实时荧光定量RT-PCR方法,根据GenBank中鸭IFN-γ基因序列,在保守区域设计并合成一对引物,采用SYBR Green I染料,建立检测鸭IFN-γmRNA的实时荧光定量RT-PCR方法(real-ti me RT-PCR)。试验以PCR产物为标准品,建立标准曲线,随后进行熔解曲线分析和稳定性研究。结果Ct值线性范围为12.0~33.0,相关系数为0.997;熔解曲线显示产物为单特异峰,Tm为82.5±0℃;组内变异系数(CV%)为4.26%;组间试验无显著差异(P>0.05)。建立的检测鸭IFN-γmRNA的Real-ti me RT-PCR方法具有检测范围广、扩增效率高、特异性好、重复性和稳定性良好等特点。
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关 键 词: | 鸭 γ干扰素 实时荧光定量RT-PCR SYBR GreenI |
文章编号: | 1007-5038(2008)05-0017-04 |
修稿时间: | 2008年1月7日 |
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