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梅花鹿γ干扰素克隆表达及抗病毒活性测定
引用本文:刘颖,刘冬光,廖娟红,于清龙,熊家军,杨利国,陈焕春,郭爱珍.梅花鹿γ干扰素克隆表达及抗病毒活性测定[J].动物医学进展,2009,30(11):1-5.
作者姓名:刘颖  刘冬光  廖娟红  于清龙  熊家军  杨利国  陈焕春  郭爱珍
作者单位:1. 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,湖北武汉,430070;华中农业大学动物医学院,湖北武汉,430070
2. 华中农业大学动物科技学院,湖北武汉,430070
基金项目:国家973项目,湖北省自然基金重大项目,艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治科技重大专项 
摘    要:提取经植物血凝素诱导培养的梅花鹿外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出梅花鹿γ干扰素成熟蛋白基因并将其克隆到pMD18-T载体上,测序结果表明,扩增片段为梅花鹿γ干扰素成熟蛋白序列,与GenBank上发表的干扰素序列同源性为100%.将其重组到原核表达载体pET32a(+)上,并在大肠埃希菌BL21中实现了高效表达.表达产物以His-Tag融合蛋白的形式存在,表达量约占细菌总蛋白的32.6%.用镍亲和层析法对蛋白进行纯化,并利用VSV-MDBK/IBRV细胞系统分析其生物活性,重组梅花鹿γ干扰素抗病毒活性分别约为7.25×104 U/mL和4.61×104 U/mL.结果表明,重组梅花鹿γ干扰素特异性好,而且抗病毒活性比较稳定.

关 键 词:梅花鹿  γ干扰素  抗病毒活性

Cloning and Expression of IFN-γ from Cervus nippon and Its Antiviral Activity Analysis
LIU Ying,LIU Dong-guang,LIAO Juan-hong,YU Qing-long,XIONG Jia-jun,YANG Li-guo,CHEN Huan-chun,GUO Ai-zhen.Cloning and Expression of IFN-γ from Cervus nippon and Its Antiviral Activity Analysis[J].Progress In Veterinary Medicine,2009,30(11):1-5.
Authors:LIU Ying  LIU Dong-guang  LIAO Juan-hong  YU Qing-long  XIONG Jia-jun  YANG Li-guo  CHEN Huan-chun  GUO Ai-zhen
Institution:LIU Ying 1,2,LIU Dong-guang1,LIAO Juan-hong3,YU Qing-long 1,XIONG Jia-jun 3,YANG Li-guo3,CHEN Huan-chun 1,GUO Ai-zhen 1,2(1.The State Key Laboratory of Agricultural Microbiology,Huazhong Agricultural University,Wuhan,Hubei,430070,China,2.College of Veterinary Medicine,3.College of Animal Science and Technologe,China)
Abstract:
Keywords:Cervus nippon  interferon-gamma  antiviral activity  
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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