| H5N1禽流感病毒NA基因重组腺病毒表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 王青,胡建和,徐彦召,朱国坡,宋涛,李任峰.H5N1禽流感病毒NA基因重组腺病毒表达载体的构建[J].动物医学进展,2010,31(6). |
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| 作者姓名： | 王青 胡建和 徐彦召 朱国坡 宋涛 李任峰 |
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| 作者单位： | 1. 河南科技学院动物科学学院,河南新乡,453003
2. 中国农业科学院上海兽医研究所,上海,200241 |
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| 基金项目： | 河南省高校杰出科研人才创新工程项目 |
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| 摘 要： | 构建携带有H5N1亚型AIV NA基因的重组腺病毒表达载体,为进一步研究AIV中NA基因在病毒致病过程中的作用及相关诊断试剂的开发提供依据。采用PCR的方法从构建好的包含有H5N1AIV NA基因的pMD-19T-N1质粒中扩增出NA基因,定向插入pAdtrack-CMV腺病毒穿梭质粒中,含有目的基因的腺病毒穿梭质粒pAdtrack-N1与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在基因工程菌BJ5183中进行同源重组,获得腺病毒质粒pAdeasy-N1,将pAdeasyd-N1经pacⅠ线性化后转染HEK293细胞株,包装出含有NA基因的腺病毒pAd-N1。结果表明,构建含有目的基因的腺病毒穿梭质粒pAdtrack-N1和含有目的基因的腺病毒质粒pAdeasy-N1经PCR、双酶切及核苷酸测序测定无误。线性化后的pAdeasy-N1转染HEK293细胞,成功获得腺病毒pAd-N1载体,经绿色荧光蛋白和RT-PCR分析证实,目的基因在该细胞中成功表达。
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| 关 键 词： | 腺病毒载体 AIV H5N1亚型 NA基因 载体构建 |
Construction of Recombinant Adenovirus Expression Vector Containing NA Gene of H5N1 Avian Influenza Virus |
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| WANG Qing,HU Jian-he,XU Yan-zhao,ZHU Guo-po,SONG Tao,LI Ren-feng.Construction of Recombinant Adenovirus Expression Vector Containing NA Gene of H5N1 Avian Influenza Virus[J].Progress In Veterinary Medicine,2010,31(6). |
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| Authors: | WANG Qing HU Jian-he XU Yan-zhao ZHU Guo-po SONG Tao LI Ren-feng |
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