| 鸡MHCⅠα和β2m的原核表达与多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 戴银,王承志,刘生杰,沈学怀,赵瑞宏,胡晓苗,张丹俊.鸡MHCⅠα和β2m的原核表达与多克隆抗体的制备[J].动物医学进展,2016(5). |
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| 作者姓名： | 戴银 王承志 刘生杰 沈学怀 赵瑞宏 胡晓苗 张丹俊 |
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| 作者单位： | 1. 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所,安徽合肥,230031;2. 安徽农业大学动物科技学院,安徽合肥,230036;3. 阜阳师范学院生物与食品工程学院,安徽阜阳,236041 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31302044)；安徽省科技攻关项目(11010302119)；安徽省教育厅自然科学研究重点项目(KJ2013A203) |
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| 摘 要： | 为制备MHCⅠ基因工程疫苗的基础材料,构建了鸡MHCⅠ分子重组质粒并进行原核表达,进而制备鸡MHCⅠ分子的多克隆抗体。应用PCR方法,克隆鸡MHCⅠα和β2m基因,构建重组载体pETMHCⅠα和pET-MHCⅠβ2m,经PCR、双酶切和测序鉴定后,将重组质粒在大肠埃希菌Rosetta中进行诱导表达,融合蛋白纯化后,接种昆明小鼠制备多克隆抗体,血清稀释后用免疫印迹法(Western blot)分析。结果表明,鸡MHCⅠα和β2m基因在大肠埃希菌中成功表达,融合蛋白分子质量分别约为52.1ku和33.0ku;制备的鼠抗鸡MHCⅠα和β2m链多克隆抗体,经Western blot检测证实抗体特异性较强,可进一步用于鸡MHCⅠ分子的研究。
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| 关 键 词： | 鸡MHCⅠ类分子 原核表达 多克隆抗体 |
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