丁酸梭菌介导mTOR信号通路调控猪肠上皮细胞炎症反应的分子机制

本试验旨在研究丁酸梭菌（CB）介导雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路调控产肠毒素大肠杆菌K88（ETEC K88）感染猪肠上皮细胞（IPEC-J2）炎症反应的分子机制。按试验步骤处理细胞，利用1×103 cfu/mL 的ETEC K88感染IPEC-J2以及400 nmol/L的mTOR抑制剂处理IPEC-J2，到达作用时间后，分别收集细胞及培养上清，然后按照猪肿瘤坏死因子（TNF-α）和猪白细胞介素-8（IL-8）检测试剂盒说明书进行细胞因子检测，以及使用荧光定量PCR（qPCR）法进行ZO-1、occludin和mTOR表达量的检测。结果表明：与ETEC组相比，抑制剂+ETEC组、CB+ETEC组和抑制剂+CB+ETEC组ZO-1和occludin的表达量均显著升高，或有升高趋势，ZO-1的表达量分别升高了86.59%、31.48%和133.98%，occludin的表达量分别升高了69.34%、18.63%和87.52%，而mTOR的表达量分别降低了40.81%、11.62%和52.43%。与CB+ETEC组相比，抑制剂+CB+ETEC组在mTOR活性被抑制后ZO-1和occludin的表达量极显著升高了77.97%和58.07%，而mTOR的表达量极显著降低了46.18%，CB与抑制剂协同逆转ETEC造成的紧密连接蛋白表达下降。综上所述，ETEC K88能够激活mTOR信号通路，而CB通过介导mTOR信号通路能够降低ETEC K88感染IPEC-J2引起的炎症反应，并提高紧密连接蛋白的表达量，从而减轻细胞损伤。 关键词] 猪肠上皮细胞|丁酸梭菌|产肠毒素大肠杆菌K88|mTOR信号通路|肠道健康