猪流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎病毒、A群轮状病毒和嵴病毒多重RTPCR检测方法的建立及临床应用

本研究建立了可同时检测猪流行性腹泻病毒（Porcineepidemicdiarrheavirus，PEDV）、传染性胃肠炎病毒（TransmissiblegastroenteritisVirus，TGEV）、A群轮状病毒（GroupArotavirus，GARV）和猪嵴病毒（Porcinekobu—virus）的多重RT—PCR方法。检测中，建立的多重RT—PCR方法能够检测到500Pg的TGEV、PEDV、GARV和猪嵴病毒等量混合RNA模板，与常规的单一RT—PCR检测结果基本相同（检测TGEV、PEDV、GARV和猪嵴病毒的灵敏性分别为1000A、1000／6、93．33％和96．67％，特异性均为i00％）。结果表明，建立的多重RTPCR方法敏感性和特异性良好，可作为临床上猪病毒性腹泻病因快速、高效的诊断工具。应用该方法对2010—2012年华中地区190份腹泻仔猪样本进行检测，PEDV、TGEV、GARV和猪嵴病毒的阳性率分别为62．11％、0．53％、7．37％和82．11％。混合感染方面，PEDV和猪嵴病毒混合感染率为47．89％，PEDV和GARV混合感染率为4．74％，GARV和猪嵴病毒混合感染率为7．37％，PEDV、GARV和猪嵴病毒混合感染率为4．74％，未发现TGEV与其它3种病毒的混合感染情况。另外，有27份样本中仅检出PEDV（14．21％），57份样本只检出猪嵴病毒（30％）。分析表明，我国自2010年底大面积暴发的病毒性腹泻是多病原混合感染造成的，主要病原为PEDV，猪嵴病毒在其中所起作用尚待进一步验证和研究。